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Comunidad, distrito de Jinniu, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan/87777 Renmin North Road Sección 1/3337393 Jardín de infancia Jinlei, distrito de Jinniu, ciudad de Chengdu/No 2, Guangrong North Road, distrito de Jinniu, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan/87643424 Jardín de infancia Caofang, Jinniu Distrito, ciudad de Chengdu/Grupo 4, aldea de Zhaohua, municipio de Yingmenkou, distrito de Jinniu, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan/87529831 Distrito de Jinniu, ciudad de Chengdu Jardín de infantes Beibei/No. 7, sección 2, primera carretera de circunvalación norte, distrito de Jinniu, ciudad de Chengdu, Provincia de Sichuan/831736448 Sichuan/87624230 Jardín de infantes Chengdu Eleven (Jiaxiang)/No. 5 Guangxin Road, distrito de Wuhou, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan 1/85130533 Jardín de infantes holístico de la ciudad nueva de Golden Apple Jinguan/distrito oeste de la ciudad nueva de Jinguan, New Hope Road, Chengdu Ciudad, provincia de Sichuan/85219363 Chengdu (Singapur) Jardín de infancia Vincent Xiaoxing/Jardín Pangu n.º 21, distrito de Wuhou, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan/8544558 Distrito de Wuhou, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan Jardín de infancia Qiqi de la aldea de Qiaoshunjiang/85032203 Jardín de infancia del Departamento de Agricultura de la provincia de Sichuan /No.4 Wuhouci Street/5552811-3104 Jardín de infantes Chengdu Beite/Gaoxin Kai, ciudad de Chengdu, provincia de Sichuan
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Concentraciones de desinfectantes comúnmente utilizados en cultivo celular y sus aplicaciones 2. Debe haber un suministro adecuado de nutrientes y no debe haber sustancias nocivas, incluidas trazas de iones nocivos. Por este motivo, debemos prestar atención a la limpieza del equipo y a la calidad del agua utilizada para el despacho. El cultivo celular tiene requisitos muy altos en cuanto a la calidad del agua (ver tratamiento del agua). 3. Asegure una cantidad adecuada de suministro de oxígeno. El metabolismo celular requiere aire; de lo contrario, las células morirán. Al realizar un cultivo estático en una botella de cultivo o un cultivo rotativo en una botella giratoria, siempre que la cantidad de líquido de cultivo no supere el 30 % del volumen total, se puede garantizar suficiente oxígeno para las células mediante el intercambio de aire con la superficie del líquido. Al sumergir cultivos en frascos, se debe proporcionar ventilación. Generalmente se utiliza aire que contiene 5 CO2, o se mezclan CO2, N2, O2 y aire en diferentes proporciones según sea necesario. El exceso de oxígeno también es perjudicial para el crecimiento celular. 4. Los productos nocivos producidos en el metabolismo celular deben eliminarse en cualquier momento. Las células producen durante su metabolismo una gran cantidad de residuos metabólicos, como CO2, ácido láctico, amoniaco, urea, indol, etc. Estos productos son perjudiciales para la supervivencia de las células y deben eliminarse a tiempo. En una pequeña cantidad de cultivo, cuando el indicador rojo de fenol en el medio se vuelve amarillo, significa que se ha producido una cantidad considerable de ácido láctico y es necesario reemplazar el medio con medio nuevo a tiempo. Durante el cultivo a gran escala, es necesario medir los contenidos de glucosa y ácido láctico en cualquier momento y ajustar la velocidad de perfusión para mantener los metabolitos en niveles inofensivos. 5. Tener un buen ambiente externo adecuado para su supervivencia. Incluyendo temperatura, valor de pH, presión osmótica y concentración de iones, etc. Diferentes células tienen diferentes requisitos de pH. En términos generales, el pH adecuado para el crecimiento celular es 6.7.4. Demasiado alto o demasiado bajo no favorece el crecimiento celular. Como se mencionó anteriormente, las células producen grandes cantidades de ácido láctico durante el metabolismo, lo que reduce el pH del cultivo. Para mantener el valor del pH del medio de cultivo, normalmente se añaden al medio de cultivo varios sistemas tampón. Como Na2HPO4/Na2HPO4, NaHCO3/H2CO3 (CO2), triglicina y solución de Hepes con tampón (la concentración común es de 10 ~ 50 mol/l). 6. Inocular a tiempo y mantener la densidad celular adecuada (ver pases celulares) 2. Aislamiento celular 1. Aislamiento de leucocitos humanos. Comúnmente utilizado para preparar IFN-α y γ. Proviene principalmente de sangre venosa de donantes de sangre, pero también de sangre residual de la circulación extracorpórea durante la cirugía, sangre del cordón umbilical, bazo, amígdalas y otros tejidos durante el parto. 2. Aislar células de miometrio embrionario humano para preparar interferón-β. 3. Cálculo de la edad celular in vitro. La edad de las células diploides se calcula duplicando la población celular, en función del número de células en cada población celular en cada recipiente de cultivo. Cada duplicación se considera una generación, es decir, 1 botella por 2 botellas (proporción de semillas 1:2). y luego las botellas llenas se consideran una generación; las botellas 1 a 4 (1:4) son la segunda generación y las botellas 8 (1:8) son la tercera generación. La edad de producción de las células se limita a los primeros 2/3 de la vida útil de la célula. Las líneas celulares pasadas se subcultivan de acuerdo con una determinada proporción de dilución, y cada pase es una generación. Basándose en los datos empíricos reales de cada línea celular, se garantiza la calidad y seguridad de las células. Determinar la última generación de células restringidas utilizadas en producción. 4. Prueba de identificación celular Las líneas o cepas celulares recién creadas, los bancos de células y las células al final de la producción deben identificarse como tales. Se pueden utilizar caracterización genética, huellas dactilares de ADN, marcadores cromosómicos, métodos inmunológicos, HLA y bioquímicos (tales como isoenzimas), cualquiera de los cuales puede elegirse. También se encuentran disponibles métodos simples y reconocibles. Sin embargo, debe ser aprobado por la agencia nacional de pruebas de drogas. Las líneas celulares diploides humanas se derivan de pulmones fetales humanos normales u otros tejidos y se utilizan principalmente para cultivar virus y preparar vacunas.
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Free868 proporciona 20 millones de espacio de red gratuito, soporte de dibujo SSI/PHP/MySQL/GD y servicios de transferencia de direcciones. Kingsoft Netscape está ubicado en Shanghai, ofrece 10 millones de espacio y admite FTP, PHP 3 y CGI. Sybase (pero a veces inestable) Kuwang Information Dissemination Network proporciona espacio web gratuito freedom2surf está ubicado en el Reino Unido, proporciona 20 millones de espacio, admite perl, php3, proporciona correo electrónico y nombres de dominio secundarios Zhonghua 12E proporciona 20 millones de espacio ASP y solicita CGI/PHP apoyo. Basada en la red educativa, la base de la página de inicio personal de Xiaoaojianghu proporciona 30 MB de espacio de página de inicio gratuito, admite ventanas FTP y proporciona 30 millones de espacio, ¡y solicita soporte de base de datos ASP / ACCESS! También puedes ir a un nombre de dominio o agregar espacio. WinAMP proporciona espacio 3G para que almacene sus propios archivos MP3, zDen proporciona 500 M de espacio en el disco duro de la red, el sistema fuera de línea 2928 proporciona 15 M de espacio libre en la página de inicio, admite redes CGI/PHP4/SSI y proporciona 30 M de espacio, y es una completa tontería. guía. Le permite crear hermosas páginas fácilmente. BigSiteCity proporciona 100 millones de espacio web compatible con FTP y también proporciona algunos servicios relacionados con el sitio NetCabins, que proporcionan entre 12 y 60 millones de espacio compatible con FTP/CGI/PHP/SSI. ASP soporta la próxima Bahía de Información de Shuangcheng, proporcionando 50 millones de espacio, mantenimiento FTP y aplicaciones de correo electrónico. Si es necesario, puede aumentar el espacio. Portland proporciona 15 millones de espacio CGI, admite FTP y no tiene publicidad. Desafortunadamente, el límite de tráfico mensual es de 100 millones. Nexen proporciona 100 millones de espacio libre totalmente funcional (PHP/base de datos, etc.), pero la página está en francés. La línea directa de la antigua ciudad proporciona espacio gratuito ilimitado en la página de inicio y el puerto de información del mantenedor FTP proporciona 20 millones. espacio gratuito en la página de inicio. Mantenimiento FTP, BBS, contador, libro de visitas Zhuhai proporciona espacio gratuito ilimitado en la página de inicio, mantenimiento FTP Western Snapshot proporciona espacio gratuito en la página de inicio, mantenimiento FTP Ningbo Information Port proporciona 5 MB de espacio gratuito en la página de inicio con contador, libro de visitas y admite carga por FTP, Huzhou Telecom proporciona 20 millones de espacio gratuito en la página de inicio , con 1 millón de correo electrónico gratuito. Hay un mostrador y un libro de visitas número 1, que es genial. Se lanzó 30 millones de espacio en la página de inicio, 100 millones de ancho de banda del host y admite asp/php. Debe insertar anuncios de forma gratuita. Alojamiento web compatible con 10 ASP ACCESS SQL en Windows del este de China. Sin anuncios. Envíe el nombre de dominio de tercer nivel y la dirección de correo electrónico. Después del registro, se le solicitará que solicite el primer espacio en el host para proporcionar espacio temporal ilimitado. El servicio de página de inicio gratuito que admite CGI/PHP/MYSQL/SSI proporciona un espacio asp gratuito de 50 MB muy estable. Admite localización FTP y proporciona 100 MB de espacio. , Buzón de correo de 100 my nombre de dominio de tercer nivel. Internet completo proporciona espacio ilimitado para admitir PHP. La página de inicio de MYSQL puede proporcionar temporalmente espacio gratuito en la página de inicio de China University Student Network, admite asp y proporciona 30 millones de espacio web gratuito, admite asp/FTP y también puede enviar correos electrónicos gratuitos para proporcionar 100 millones de espacio para admitir CGI/PHP (pronto admitirá ASP). Se abrirá inmediatamente después de la aplicación. Simplemente ingrese su contraseña y dirección de correo electrónico. Oso proporciona entre 1 y 20 millones de espacio libre para PHP/MySQL. Surecity proporciona espacio gratuito ilimitado para MySQL, PHP, red dinámica SSI, ASP, CGI y bases de datos. eNetcom proporciona espacio web autogenerado en 2 minutos.
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