Uso y principio de funcionamiento del cromatógrafo líquido.
Principio de funcionamiento:
La fase móvil fluye a través de la válvula de inyección a través de la bomba de infusión, se mezcla con la solución de muestra, fluye a través de la columna cromatográfica y se adsorbe y separa en la columna cromatográfica. Finalmente, cada uno de los componentes se convierte en señales eléctricas a través del detector y los picos de muestra correspondientes aparecen en la estación de trabajo de cromatografía.
Uso de cromatografía líquida:
Primero pretratar la muestra, luego inyectar la muestra. Una vez completada la inyección, limpiar la entrada. Después de cada análisis, limpiar el canal. el instrumento.
Información ampliada:
Los conceptos básicos utilizados en cromatografía líquida: valor de retención, número de placas, altura de placa, resolución, selectividad, etc. son coherentes con la cromatografía de gases. La teoría básica utilizada en la cromatografía líquida: la teoría de la bandeja y la ecuación de velocidad son básicamente las mismas que las de la cromatografía de gases. Sin embargo, debido a que en la cromatografía de gases se utiliza líquido como fase móvil en lugar de gas en la cromatografía de gases, las propiedades del líquido y del gas. son diferentes.
Además, los equipos y las condiciones de funcionamiento utilizados en la cromatografía líquida también son diferentes a los de la cromatografía de gases. Por lo tanto, existen ciertas diferencias entre la cromatografía líquida y la cromatografía de gases.
Existen principalmente los siguientes aspectos:
①Las condiciones de funcionamiento y el rango de aplicación son diferentes.
Para la cromatografía de gases, es una operación de calentamiento. Sólo puede analizar sustancias que pueden vaporizarse sin descomponerse a la temperatura de funcionamiento. Es difícil separar y analizar compuestos de alto punto de ebullición, sustancias no volátiles, compuestos térmicamente inestables, compuestos iónicos y polímeros, lo que limita en cierta medida su aplicación. Según las estadísticas, mediante cromatografía de gases sólo se pueden analizar unos 20 compuestos orgánicos.
LC funciona a temperatura ambiente y no está limitado por la volatilidad de la muestra ni la estabilidad térmica. Es muy adecuado para sustancias y compuestos iónicos con grandes pesos moleculares relativos que son difíciles de vaporizar, no son fácilmente volátiles o son sensibles a. El calor y el análisis de separación de polímeros representan aproximadamente el 70 ~ 80% de la materia orgánica.
② La cromatografía líquida puede completar tareas de separación difíciles
a. El gas portador de fase móvil de la cromatografía de gases es cromatográficamente inerte y básicamente no participa en el proceso de distribución y equilibrio e interactúa con la muestra. Moléculas No hay interacción de afinidad y las moléculas de la muestra interactúan principalmente con la fase estacionaria. En la cromatografía líquida, la fase móvil líquida también compite con la fase estacionaria por las moléculas de muestra, lo que agrega otro factor para mejorar la selectividad. También se pueden elegir dos o más líquidos en diferentes proporciones como fases móviles para aumentar la selectividad de separación.
b. Hay muchos tipos de fases estacionarias en la cromatografía líquida, como la cromatografía de intercambio iónico y la cromatografía de exclusión. A la hora de analizar, hay mucho espacio para elegir, pero no es posible con la cromatografía de gases.
c. La cromatografía líquida generalmente se realiza a temperatura ambiente. Las temperaturas más bajas generalmente son beneficiosas para la selección de las condiciones de separación cromatográfica.
③ Dado que la difusividad del líquido es 105 veces menor que la del gas, la tasa de transferencia de masa del soluto en la fase líquida es lenta y el efecto extracolumna es particularmente importante en la cromatografía de gases; columna cromatográfica La expansión causada por la región exterior es insignificante.
④ En la cromatografía líquida, la preparación de la muestra es simple y la recuperación de la muestra es relativamente fácil. Además, la recuperación es cuantitativa y adecuada para la preparación a gran escala. Sin embargo, la cromatografía líquida todavía carece de un detector universal y es relativamente complicada. y caro. En aplicaciones prácticas, estas dos tecnologías se complementan.
En resumen, la cromatografía líquida tiene las ventajas de una alta eficiencia de columna, alta selectividad, alta sensibilidad, rápida velocidad de análisis, buena repetibilidad y amplio rango de aplicación. Este método se ha convertido en la primera opción de la tecnología analítica moderna. Uno de los principales medios. Actualmente, se utiliza ampliamente en química, industria química, medicina, bioquímica, protección ambiental, agricultura y otros campos científicos.
La cromatografía líquida de alta resolución se utiliza ampliamente en casi todos los campos del análisis cuantitativo y cualitativo.
(1) Separación de mezclas
La cromatografía líquida de alta resolución solo requiere que la muestra se pueda convertir en una solución y no está limitada por la volatilidad de la fase móvil. una amplia gama de opciones y la fase estacionaria Hay muchos tipos de materiales, por lo que puede separar sustancias térmicamente inestables y no volátiles, disociadas y no disociadas, y sustancias en varios rangos de peso molecular.
Junto con la tecnología de pretratamiento de muestras, la alta resolución y la alta sensibilidad logradas por la cromatografía líquida de alto rendimiento pueden separar y medir simultáneamente sustancias con propiedades muy similares y pueden separar sustancias en mezclas complejas.
Y con el desarrollo de fases estacionarias, se puede completar la separación de sustancias bioquímicas manteniendo plenamente su actividad.
(2) Análisis bioquímico
Debido a que la cromatografía líquida de alto rendimiento tiene las ventajas de alta resolución, alta sensibilidad, velocidad rápida, columnas cromatográficas reutilizables y fácil recolección de componentes efluentes, por lo tanto , se utiliza ampliamente en diversos campos como la bioquímica, el análisis de alimentos, la investigación médica, el análisis ambiental, el análisis inorgánico, etc., y se ha convertido en el método más prometedor para resolver problemas de análisis bioquímico.
(3) Combinación de instrumentos
La combinación de cromatografía líquida de alto rendimiento e instrumentos estructurales es una dirección de desarrollo importante. La tecnología de cromatografía líquida de alto rendimiento y espectrometría de masas ha recibido amplia atención, como el análisis de pesticidas carbamatos e hidrocarburos aromáticos polinucleares. La tecnología de cromatografía líquida de alto rendimiento y espectrometría de infrarrojos también se ha desarrollado rápidamente, como la determinación de hidrocarburos en agua en condiciones ambientales. análisis de contaminación. Permitir nuevos desarrollos en el análisis de la contaminación ambiental
Referencia: Enciclopedia Baidu - Cromatografía líquida