¿Cuáles son los detectores de columna de cromatografía líquida más comunes?
1. El detector de absorción ultravioleta (UVD) es actualmente el detector más utilizado en cromatografía líquida de alta resolución. Sus características principales son alta sensibilidad, amplio rango lineal, insensibilidad a los cambios en el caudal y la temperatura, y puede usarse para elución en gradiente. Requiere que los componentes de la muestra a detectar absorban los rayos ultravioleta y es un detector selectivo.
2. El detector de matriz de diodos (PDAD) es un detector óptico multicanal que apareció recién en la década de 1980. Puede considerarse como una rama de UVD. Después del escaneo espectral de cada componente eluido y el procesamiento por computadora, se puede obtener un diagrama tridimensional que combina espectro y cromatografía. Entre ellos, el espectro de absorción se usa para análisis cualitativo (para confirmar si se trata de una sola sustancia pura) y la cromatografía se usa para análisis cuantitativos. A menudo se usa para análisis cualitativos y cuantitativos de muestras complejas (como muestras biológicas, medicina china). materiales).
3. El detector de fluorescencia (FLD) también es un detector selectivo. Su sensibilidad es la más alta entre los detectores de cromatografía líquida de alto rendimiento utilizados actualmente y tiene muchas aplicaciones, solo superada por UVD. Es adecuado para compuestos que excitan la fluorescencia. Muchas sustancias relacionadas con las ciencias de la vida, como aminoácidos, aminas, vitaminas, esteroides y ciertos fármacos metabólicos, pueden detectarse mediante fluorescencia. Los detectores de fluorescencia se pueden utilizar para análisis a nivel de trazas de muestras biológicas, especialmente para la detección de cantidades muy pequeñas de aminoácidos y péptidos después de la derivatización con fluorescencia.
Detector universal
1. El detector de índice de refracción (RID) es un detector universal que se puede utilizar siempre que exista una diferencia de índice de refracción entre el componente que se está midiendo y el eluyente. Utilice este detector. En las ciencias biológicas se encuentran con frecuencia varios tipos de compuestos de azúcar que no tienen absorción de rayos UV, por lo que a menudo se utiliza RID. Es más versátil que UVD, pero es menos sensible a los cambios de temperatura y no es compatible con la elución en gradiente, lo que limita su uso.
2. El detector de dispersión de luz evaporativa (ELSD) es también un detector universal que puede detectar cualquier muestra con una volatilidad menor que la fase móvil sin necesidad de que la muestra contenga cromóforos. El valor de respuesta de ELSD es proporcional a la masa de la muestra, por lo que puede usarse para determinar la pureza de la muestra o detectar sustancias desconocidas. ELSD tiene mayor sensibilidad que RID, es insensible a los cambios de temperatura, tiene una línea de base estable y puede usarse para elución en gradiente. Puede usarse para elución en gradiente. Actualmente, ELSD se ha utilizado ampliamente en la detección de carbohidratos, lípidos, ácidos grasos y aminoácidos, fármacos y polímeros.
3. El detector de espectrometría de masas (MSD) es otro detector universal con ventajas sobresalientes en sensibilidad, selectividad, versatilidad y proporciona información estructural y de peso molecular de los compuestos. Sin embargo, su elevado coste de funcionamiento y su complejidad limitan su promoción y aplicación.