¡Cómo reducir la degradación del ARN al extraer ARN tisular!

1: Todas las puntas de pipeta y tubos de centrífuga utilizados deben remojarse en agua DEPC al 0,1% durante la noche, esterilizarse y secarse antes de su uso. Por supuesto, estos consumibles están disponibles comercialmente.

2: Toda el agua utilizada en los experimentos es agua DEPC al 0,1% (esterilizada e inactivada).

3: Triturar con nitrógeno líquido El tiempo de lisis no debe ser demasiado largo. Si se requiere purificación, el ARN crudo extraído debe purificarse lo antes posible y no dejarlo por mucho tiempo.

4: Al retirar NDA, el tiempo de tratamiento con DNasa debe ser corto, no más de 30 minutos.

5: Intente operar en condiciones de baja temperatura. Use una máscara y tenga cuidado de no dejar que el agua toque la boca del tubo cuando opere sobre hielo. El agua del grifo, el tono de voz de una persona y la saliva pueden contaminar el ARN.