La contribución académica de Wang Huaqiao

1. Investigación sobre el envejecimiento cerebral y sus mecanismos

Estudió una maestría en anatomía humana en la Universidad Médica Sun Yat-sen de septiembre de 1988 a julio de 1991, y completó la maestría. Bajo la dirección del profesor Tang Tingyong, el artículo "Cambios relacionados con la edad en el núcleo arqueado del hipotálamo de ratas" encontró que las neuronas, las células gliales y las sinapsis del núcleo arqueado del hipotálamo de ratas envejecidas, así como el β- Las neuronas endorfingicas, sufren cambios relacionados con la edad. -Los cambios en la función fisiológica del eje pituitario proporcionan una base morfológica. El hipocampo está estrechamente relacionado con el aprendizaje y la memoria, y las capacidades de aprendizaje y memoria de las personas mayores y los pacientes con enfermedad de Alzheimer disminuyen. Realizamos estudios detallados sobre el desarrollo de la formación del hipocampo y las neuronas de aminoácidos excitadores, proporcionando abundantes datos morfológicos sobre el envejecimiento cerebral.

2. Lesión del nervio periférico y su reparación

Financiado por dos proyectos de la Consejería Provincial de Salud, estudiamos el efecto de la inyección intramuscular diana de factor de crecimiento de fibroblastos básico sobre la regeneración y reparación de la lesión del nervio ciático. El efecto de la recuperación funcional, el efecto del extracto de médula espinal de embriones humanos sobre la supervivencia y el crecimiento de las neuronas motoras en el asta anterior de la médula espinal de ratones embrionarios y el efecto del trasplante de neuronas motoras embrionarias en los músculos denervados. Proporciona una nueva vía de administración para la aplicación clínica del factor de crecimiento de fibroblastos básico.

3. Investigación experimental sobre la enfermedad de Alzheimer e investigación sobre métodos de diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer mediante biología molecular

⑴ Investigación sobre el diagnóstico genético y de biología molecular de la enfermedad de Alzheimer

En En la actualidad, el diagnóstico precoz de la EA antes de la muerte sigue siendo un gran problema en neuropsiquiatría. Hasta el momento, no se ha encontrado un indicador de diagnóstico biológico que cumpla plenamente con los requisitos. Por lo tanto, es muy importante encontrar un indicador biológico eficaz para el diagnóstico premortem. diagnóstico temprano significativo. No sólo puede diagnosticar la enfermedad de Alzheimer en forma temprana, guiar los planes de tratamiento clínico y esforzarse por lograr un tratamiento temprano, sino que también puede hacer posibles estudios controlados entre diferentes instituciones de investigación utilizando los mismos indicadores bioquímicos, sentando las bases para dilucidar aún más la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer. Actualmente estamos realizando investigaciones sobre el diagnóstico genético y de biología molecular de la enfermedad de Alzheimer con financiación de la Fundación Nacional y Provincial de Ciencias Naturales de Guangdong, y hemos logrado buenos resultados.

①Se estableció con éxito un método de RT-PCR cuantitativa de fluorescencia para detectar los genes APP y HO-1.

Se estableció con éxito un método de RT-PCR cuantitativa de fluorescencia para detectar los genes APP y HO-1 y se encontró Los genes APP y HO-1 se expresan en niveles elevados en células de pacientes con enfermedad de Alzheimer y están relacionados con la gravedad de la EA. El siguiente paso será analizar una gran cantidad de muestras y compararlas con otros métodos de detección para explorar si se espera que la detección de los genes APP y HO-1 sea un indicador biológico para detectar la EA.

②Estudio sobre la correlación entre el gen ApoE y los polimorfismos D10S1225 y la enfermedad de Alzheimer

Uno o más loci de susceptibilidad en el brazo largo del cromosoma 10 y la enfermedad de Alzheimer de aparición tardía Se relaciona con el Alzheimer enfermedad (LOAD) A través del análisis de vínculo familiar, la puntuación Lod multipunto máxima (puntuaciones lod máximas multipunto) se obtuvo cerca del locus D10S1225, lo que sugiere la posible importancia etiológica de este locus para LOAD. Establecimos con éxito el método de hibridación de puntos inversos para genotipificar ApoE (número de solicitud de patente china: 2004100525307). El genotipado D10S1225 se realizó mediante electroforesis en gel de poliacrilamida y tinción con plata. Se encontró que la distribución de la frecuencia del alelo ε4 de ApoE en el grupo de casos fue significativamente mayor que en el grupo de control. Se detectaron 7 alelos en el locus D10S1225, con tamaños de 178 pb, 181 pb, 184 pb, 187 pb, 190 pb, 193 pb y 196 pb. respectivamente. *** consta de 21 genotipos y no existe una diferencia estadísticamente significativa en la distribución de la frecuencia de cada alelo entre casos y controles. Se sugiere que el alelo ε4 de ApoE es un factor de susceptibilidad para LOAD. Los resultados de la investigación indican que puede no haber un gen de susceptibilidad en desequilibrio de ligamiento con LOAD cerca del locus D10S1225.

③La neuroprotección y el mecanismo de la transfección del gen de la transcriptasa inversa de la telomerasa humana contra la enfermedad de Alzheimer

Utilizando el método de PCR para obtener ADNc de longitud completa de hTERT a partir de pCI-neo-hTERT, clonado direccionalmente en pADTrack- Plásmido lanzadera CMV. Mediante una transformación paso a paso, pADEasy-1 y el plásmido lanzadera de recombinación (pADTrack-hTERT) se transformaron en bacterias BJ5183 para la recombinación homóloga. El plásmido principal del adenovirus recombinante hTERT (pAD-hTERT) se transfectó en células HEK293 y se observó la expresión de la proteína verde fluorescente (GFP) bajo un microscopio de fluorescencia. El ADN extraído del adenovirus recombinante (AD-hTERT) se recogió para su identificación por PCR. y amplificación. La PCR, la digestión enzimática y la identificación por secuenciación confirmaron que el ADNc de hTERT se insertó correctamente en el plásmido lanzadera y se recombinó homólogamente con pADEasy-1 correctamente; la identificación por PCR y el análisis del gen indicador mostraron que el adenovirus recombinante de hTERT estaba empaquetado correctamente y tenía una buena actividad infecciosa. La construcción exitosa del adenovirus recombinante hTERT sentó las bases para la investigación sobre el efecto neuroprotector de hTERT.

⑵Investigación experimental sobre la medicina tradicional china en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer

Con el objetivo de estudiar el importante papel de la proteína β-amiloide (Aβ) en la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer, hemos llevado a cabo estudios dirigidos a Aβ Para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, se llevaron a cabo una serie de estudios sobre el mecanismo por el cual el ingrediente activo TA9901 extraído de plantas naturales afecta la agregación y la formación de fibras del péptido Aβ. La eficacia y el mecanismo de TA9901 en la prevención y el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer. Se aclaró la enfermedad y se le otorgó una patente de invención china (número de patente ZL01107662.3). También descubrimos que EGb761 puede mejorar en gran medida el efecto de TA9901 y tener un efecto sinérgico. Se utilizó el modelo de detección de fármacos por espectrofotometría de fluorescencia y se utilizaron métodos espectroscópicos para estudiar la relación cuantitativa estructura-actividad y el mecanismo molecular de la compatibilidad de los dos (TA9902), y se descubrió que TA9902 puede inhibir mejor la agregación de Ab y la formación de fibras encontradas en el cultivo; que TA9902 También tiene efectos neurotróficos, promueve la supervivencia y el crecimiento de neuritas de las neuronas de la corteza cerebral y puede reducir los efectos neurotóxicos causados ​​por Aβ. Esta investigación fue financiada por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China y varios fondos provinciales, y obtuvo 1 patente nacional. Se publicaron más de 10 artículos en revistas principales. En 2003, ganó el artículo académico destacado de segunda clase en ciencias naturales de Guangdong. Provincia y en 2004. El tercer premio del Premio Provincial de Progreso Científico y Tecnológico de Guangdong tendrá un impacto importante en la finalización de un nuevo medicamento de Clase II con derechos de propiedad intelectual independientes para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y el desarrollo de la medicina tradicional china para la prevención y el tratamiento de la EA, aportando importantes beneficios económicos y sociales.

⑶Investigación experimental sobre el tratamiento con vacunas para la enfermedad de Alzheimer

Con financiación de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de la Provincia de Guangdong y Proyectos Clave y Temas Horizontales de Ciencia y Tecnología Municipal de Guangzhou, bajo el liderazgo del Profesor Yao Zhibin, llevamos a cabo estudios experimentales sobre el tratamiento con vacunas para la enfermedad de Alzheimer. El uso del péptido Aβ42 como vacuna para realizar inmunoterapia de tipo intervención patológica para la EA es un gran avance en la investigación extranjera sobre el tratamiento de la EA en los últimos años, y también es una revolución en el tratamiento de enfermedades no transmisibles. Hemos construido con éxito una vacuna de la subunidad Aβ42 (número de solicitud de patente de invención china 03114042.4). La vacunación con la subunidad Aβ puede inducir eficazmente la producción de anticuerpos anti-Aβ42 específicos de alto título en ratas SD normales, ratones BALB/c, ratones transgénicos AD (Tg2576) y monos rhesus adultos sin reacciones adversas, lo que muestra buena inmunogenicidad y seguridad. Esta investigación fue financiada por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China y varios fondos clave provinciales y municipales de Guangzhou, y ha publicado más de 30 artículos en publicaciones nacionales y extranjeras. Nuestro objetivo es desarrollar un nuevo fármaco económico y eficaz para el tratamiento de la EA en un plazo de 3 a 5 años.

4. Diagnóstico y tratamiento dirigido a nanopartículas

Realizado el Programa Nacional de Investigación y Desarrollo de Alta Tecnología (863) Proyecto "Diagnóstico y tratamiento dirigido a nanopartículas" (Nº 2001AA218031) Investigación sobre el tema "Distribución de nanopartículas en el modelo de metástasis de osteosarcoma humano y formación de hueso ectópico inducida por matriz ósea".

En los últimos años, ha sido anfitrión, ha entregado informes especiales y ha presentado ponencias en conferencias más de 20 veces en importantes congresos de intercambio académico y clases de proyectos de educación continua en el país y en el extranjero.