¿Cuáles son los pasos de la citometría de flujo?

2. Alícuota de 1-2*106 células por tubo EP (1,5 ml) (debe tener control en blanco, estándar único y control de isotipo), 3500 rpm, 4 grados, centrífuga .

3. Resuspender en 100ul de PBS, añadir 10ul de suero de rata y sellar (u otro agente sellador), mantener a 4 grados, protegido de la luz, durante 30 minutos.

4. Añadir el correspondiente anticuerpo marcado con fluorescencia, mezclar bien, proteger de la luz e incubar a 4 grados centígrados durante 30 minutos.

5. Añadir 1ml de PBS y lavar dos veces (3500rpm, 4 grados, centrifugar).

6. Resuspender en 200ul de PBS, filtrar con una gasa y transferir al tubo de fase móvil para obtener mejores resultados de detección.

Esta es la detección de moléculas de la superficie celular. Si se detectan moléculas intracelulares, primero se debe agregar líquido penetrante de membrana, seguido de agente sellador. Si el nivel de expresión de la molécula en la célula es muy pequeño, es necesario añadir un estimulador.