Un componente cromogénico importante requerido en el experimento de Elisa es

Un componente cromogénico importante requerido en el experimento ELISA es el cromógeno A (que contiene peróxido de hidrógeno) como donante de hidrógeno (DH2).

El sustrato A del kit de inmunodiagnóstico ligado a enzimas del kit elisa es el cromógeno A (que contiene peróxido de hidrógeno) como donante de hidrógeno (DH2), y el sustrato B es el cromógeno B (que contiene TMB). , utilizado para el desarrollo del color. Además, los sustratos comúnmente utilizados incluyen: Sustrato AP, comúnmente usado es p-nitrofenilfosfato (PNP), su reactivo es p-nitrofenol amarillo y la longitud de onda de lectura es 405 nm2) Sustrato GOD, es glucosa, el donante de hidrógeno es p-nitro tetrazol azul y el producto de la reacción es un precipitado azul insoluble. ¿Qué es TMB?

TMB (tetrametilbencidina) (3,3',5,5'-Tetrametilbencidina) es un grupo altamente liposoluble, por lo que ingresa fácilmente a las células y reacciona con HRP en los orgánulos, y debido a este alto grado Debido a la solubilidad en lípidos, es fácil formar multímeros y producir precipitados espesos de color azul oscuro en el sitio activo de HRP, lo que convierte a TMB en un buen cromóforo en experimentos histoquímicos. Al mismo tiempo, la precipitación de los productos de reacción hace que el sitio activo de HRP esté más expuesto, lo que facilita la reacción de oxidación enzimática.

El producto de reacción de TMB es azul oscuro, lo cual es conveniente para la observación con microscopio óptico, y el producto de reacción se hace cada vez más grande, a menudo más allá del alcance de un solo orgánulo (mientras que DAB está limitado dentro de él). por lo que la detección del umbral de reacción de TMB es menor.