¿Cómo cultivar y mantener células de linfoma de ratón YAC-1?

Las células de linfoma de ratón YAC-1 son un modelo comúnmente utilizado para estudiar la citotoxicidad mediada por células T. Las células YAC-1 se utilizan ampliamente en el estudio de la citotoxicidad y la terapia antitumoral. Este artículo describirá cómo mantener y cultivar con éxito células de linfoma de ratón YAC-1.

1. Preparación del medio de cultivo celular

El cultivo exitoso de células de linfoma de ratón YAC-1 requiere un medio de cultivo celular adecuado. Los medios de cultivo celular más comunes incluyen medios de cultivo celular complejos, DMEM, RPMI-1640, etc. Entre estos medios, el medio de cultivo celular complejo es el más adecuado para el crecimiento de células YAC-1. Los medios de cultivo celular compuestos se pueden preparar agregando sustancias como insulina, Xiaogan, heparina y glucosa.

2. Mantener la estabilidad y pureza de las células

Durante el cultivo a largo plazo, para garantizar la pureza y estabilidad de las células YAC-1, las células deben identificarse periódicamente. Se recomienda utilizar múltiples métodos para la identificación, como morfología celular, marcadores de superficie celular, etc. Además, también es importante detectar periódicamente la atipia celular.

3. Habilidades de pase celular

En cultivo celular, el pase regular es necesario. Si las células no se pasan adecuadamente, se producirán fenómenos adversos como un crecimiento celular más lento, inactivación y mutaciones genéticas. Se recomienda utilizar una mezcla de tripsina y EDTA para el aislamiento y paso de células. Normalmente, los pases se realizan cada 7 a 10 días para garantizar la estabilidad y pureza celular.

4. Atmósfera y temperatura adecuadas

Las células de linfoma de ratón YAC-1 son células que absorben una gran cantidad de oxígeno y pueden cultivarse en condiciones de cultivo saturado de oxígeno. Se recomienda cultivar células en una incubadora a temperatura constante de 37°C con 5% de CO2. La humedad adecuada y la concentración adecuada de CO2 pueden mejorar la tasa de crecimiento y la calidad de las células.

5. Contaminación bacteriana y fúngica

Durante el proceso de cultivo, la contaminación bacteriana y fúngica puede tener efectos adversos sobre el crecimiento y la estabilidad de las células de linfoma de ratón YAC-1. Por lo tanto, durante el proceso de cultivo, se debe prestar atención a la técnica aséptica y a la esterilización del equipo de cultivo, como consumibles, áreas operativas y guantes.

6. Métodos de manipulación de células

Las células de linfoma de ratón YAC-1 son células en suspensión, por lo que es necesario prestar atención al realizar operaciones como la microinyección. Durante las operaciones de procesamiento de células, se recomienda utilizar agujas e instrumentos estériles para evitar la contaminación y el daño de las células.

En resumen, el cultivo exitoso de células de linfoma de ratón YAC-1 requiere la implementación integral de las medidas anteriores. Sólo cuando las condiciones del cultivo celular estén completamente optimizadas y estandarizadas podremos garantizar la estabilidad de las células y utilizar eficazmente este modelo para estudiar cuestiones como la citotoxicidad y el tratamiento antitumoral.