¿Qué reactivos se utilizan para cultivar células? Detallado

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La siguiente es otra respuesta conocida

1. Solución libre de iones, calcio y magnesio (1000 ml)

Cloruro de sodio (NaCl) 8 g de dihidrógeno fosfato de sodio, (NaH2PO4H20). ) 0,05 g, cloruro de potasio (KCl) 0,2 g, bicarbonato de sodio (NaHCO3) 1 g, citrato trisódico (Na3C6H5O7, H20) 1 g, glucosa 1 g, añadir agua desionizada o agua bidestilada a 1000 ml de fosfato

2. tampón

Líquido A: 0,2 mol/L de solución de hidrogenofosfato disódico, 28,4 g de hidrogenofosfato disódico (anhidro), 8,77 g de cloruro de sodio, añadir agua desionizada o agua doblemente destilada a 1000 ml de Líquido B: 0,2 mol/. L de solución de dihidrógeno fosfato de sodio, 2,4 g de dihidrógeno fosfato de sodio (anhidro), 8,77 g de cloruro de sodio, agregue agua desionizada o agua bidestilada a 1000 ml. Guarde las soluciones A y B a 4 °C. Cuando las use, siga la Tabla 3-2. la proporción mostrada, preparar a la concentración de pH requerida y almacenar a temperatura ambiente después del tratamiento en autoclave.

3. Solución de Hanks

(1) Método de preparación del licor madre A (20x) ① NaCl (A.R) 160 g, KCl (A.R) 8 g, MgSO4.7H2O (A.R) 2 g , MgCl Disuelva 2 g de 6H2O (A.R) en 800 ml de agua bidestilada en secuencia. Después de disolver la primera sustancia, agregue la última. ② Disuelva 2,8 g de CaCl2 (A.R) en 100 ml de agua bidestilada, revuelva continuamente mientras se disuelve (esta solución debe prepararse por separado y disolverse por separado). Después de que los "solutos" de las dos soluciones anteriores se hayan disuelto por completo, mézclelos, luego complete hasta 1000 ml con agua bidestilada, agregue 2 ml de cloroformo como conservante y guárdelo a 4 °C.

(2) Método de preparación de las aguas madre B (20×) ① Disolver 3,04 g de Na2HPO4.12H2O (A.R), 1,20 g de KH2PO4 (A.R) y 20,0 g de glucosa (A.R) en 800 ml de agua bidestilada. ②Ponga 0,4 g de solución de rojo fenol en un mortero de vidrio y agregue 0,01 N y 11,28 ml de NaOH hasta que todo se disuelva. Muévalo a un matraz volumétrico de 100 ml, agregue agua hasta 100 ml, filtre, ajuste el pH a 7,4 y almacene a 4. °C. Después de que los "solutos" anteriores se hayan disuelto completamente, completar hasta 1000 ml con agua bidestilada, añadir 2 ml de cloroformo como conservante y almacenar a 40°C.

3) Método de preparación de uso de la solución (1×): Tome una parte de licor madre A y de licor madre B, agregue 18 partes de agua bidestilada, después del envasado, tape la botella y cuelgue el cartel. . Autoclave a 115°C durante 25 minutos (para evitar daños a la glucosa), guárdelo a temperatura ambiente a 4°C y puede usarse durante varios meses. Antes de su uso, ajuste el pH requerido con 7,5NaHCO3.