Cómo reducir el contenido de proteínas solubles en las plantas

Determinación del contenido de azúcares solubles y proteínas solubles en plantas Resumen: Objetivo Determinar el contenido de proteínas solubles y azúcares solubles en repollo, apio y espinacas mediante el trazado de curvas estándar, y comprender los métodos de medición de Azúcar soluble y proteína soluble. Métodos Se utilizaron el método de la antrona y el método de tinción con azul brillante de Coomassie para determinar el contenido de azúcar soluble y proteína soluble en las plantas. Conclusión Palabras clave: repollo; apio; contenido de proteínas solubles; contenido de azúcares solubles; método de tinción con azul brillante de Coomassie 1 Introducción El contenido de azúcares solubles y proteínas solubles en las plantas son indicadores fisiológicos y bioquímicos importantes. En la nutrición con carbono de los cultivos, los nutrientes se refieren principalmente al azúcar y al almidón solubles. Sus principales funciones en nutrición incluyen: sintetizar celulosa para formar paredes celulares; convertir y formar otras sustancias orgánicas como nucleótidos, ácidos nucleicos, etc., que son materias primas para la síntesis de muchas otras sustancias orgánicas, como los ácidos orgánicos formados durante la descomposición. la respiración del azúcar, que puede servir como sustrato respiratorio, proporcionando la energía necesaria para diversos procesos sintéticos y diversas actividades vitales de los cultivos. Como aceptor de NH 3, se convierte en aminoácidos. Debido a que los carbohidratos tienen estas importantes funciones, son las sustancias más básicas en la nutrición y el tipo más necesario. La proteína soluble es la principal forma de nitrógeno en las plantas. Su contenido está estrechamente relacionado con el metabolismo y el envejecimiento de las plantas. Al mismo tiempo, también está estrechamente relacionado con la capacidad de la planta para mantener la presión osmótica y resistir la deshidratación. El repollo es una verdura de hoja de la familia Brassica. Es deliciosa y nutritiva. Se la conoce como el "Rey de las Verduras" y es amada por las masas. El apio es una planta de la familia de las umbelíferas y es rica en proteínas, carbohidratos, caroteno, vitaminas del grupo B, calcio, fósforo, hierro, sodio, etc. Al mismo tiempo, tiene la función de calmar el hígado y eliminar el calor, disipando viento y humedad, limpiando los intestinos, humedeciendo los pulmones y aliviando la tos, bajando la presión arterial, fortaleciendo el cerebro y teniendo efectos calmantes. La espinaca es una planta herbácea anual de la familia Chenopodiaceae. La espinaca es rica en vitamina A, vitamina C y minerales. Puede desempeñar un papel terapéutico auxiliar en diversas anemias y muchas enfermedades como la diabetes, la tuberculosis, la hipertensión, el viento, el fuego y los ojos rojos. . 2 Materiales y métodos 2.1 Determinación del contenido de azúcar soluble en plantas 2.1.1 Materiales Hojas frescas de col, apio y espinaca (0,5-1,0 g cada una después de cortarlas en trozos) 2.1.2 Reactivos Solución estándar de glucosa (200 ug/ml), antrona Reactivos 2.1.3 Instrumentos y equipos Espectrofotómetro; balanza analítica; baño de agua a temperatura constante; matraz Erlenmeyer; tijeras; papel de filtro; piezas Mezclar de 0,5 a 1,0 g de muestra fresca (o de 5 a 100 mg de muestra seca en polvo) en un tubo de ensayo grande, agregar 15 ml de agua destilada, hervir en un baño de agua hirviendo durante 20 minutos, sacar y enfriar, filtrar en un matraz aforado de 100 ml. Enjuagar el residuo con agua destilada varias veces y ajustar a volumen. Preparación de curva estándar: Tome 6 tubos de ensayo grandes, numérelos del 0 al 5 y agregue cada reactivo según la tabla. Reactivo 0 200ug/ml Solución estándar de glucosa (ml) Agua destilada (ml) Reactivo antrona (ml) Cantidad de glucosa (ug) 0 1,0 5,0 0 1 0,2 0,8 5,0 20 2 0,4 0,6 5,0 40 Número de tubo 3 0,6 0,4 5,0 60 4 0,8 0,2 5,0 80 5 1,0 0 5,0 100 Agitar cada tubo rápidamente para mezclar, hervir en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos, sacar y enfriar y preparar una curva estándar a una longitud de onda de 620 nm. Medición de la muestra: Tome 1,0 ml de la solución de extracción de muestra que se va a analizar, agregue 5 ml de reactivo de antrona y realice el desarrollo del color para medir la densidad óptica de la misma manera que se indicó anteriormente. Repita 3 veces.

Cálculo de resultados: Contenido de azúcar soluble (%) = cantidad de azúcar encontrada en la curva estándar (μg) × volumen de líquido de extracción (ml) × factor de dilución/volumen de muestra líquida para medición (ml) × peso de muestra (g) × 106 ×100 2.2 Determinación del contenido de proteína soluble en plantas 2.2.1 Materiales Hojas frescas de repollo, apio y espinaca (0,5-1,0 g cada una después del corte) 2.2.2 Solución estándar de proteína reactiva: preparada con albúmina de suero bovino para contener proteína 100 μg/ solución estándar de proteína; etanol al 85% (p/v); solución azul brillante de Coomassie 2.2.3 Instrumentos y equipo Espectrofotómetro; vaso de precipitados; Balanza analítica; Baño de agua a temperatura constante; 2.2.4 Método de determinación 0~100μg/ml Preparación de la curva estándar: Tome seis tubos de ensayo y prepare 1 ml de solución de albúmina sérica de 0~100μg/ml según los datos de la siguiente tabla. Extraiga con precisión 0,1 ml de la solución preparada de cada tubo, colóquelo en un tubo de ensayo de 10 ml con tapón, agregue 5 ml de reactivo Coomassie Brilliant Blue G-250, tape, invierta y mezcle varias veces, déjelo por 2 minutos, compare los coloree a 595 nm y dibuje la curva estándar. Número de tubo 100 μ g/ml Cantidad de albúmina sérica bovina (ml) Cantidad de agua destilada (ml) Contenido de proteína g) (μ 1 0 1,0 0 2 0,2 ​​0,8 20 3 0,4 0,6 40 4 0,6 0,4 60 5 0,8 0,2 80 6 1,0 0 100 muestras Determinación de la concentración de proteína en la solución de extracción: Tome 1,0 ml de la solución de extracción de muestra, colóquelo en un tubo de ensayo con tapón (se establecen dos réplicas para cada muestra), agregue 5 ml de solución Coomassie Brilliant Blue G-250, mezcle bien, déjelo durante 2 minutos y luego pruebe en colorimetría de 595 nm, registre el valor de absorbancia y verifique el contenido de proteína a través de la curva estándar. Calcule los resultados: Contenido de proteína de la muestra (mg/g de peso fresco) = (C*V/. a)/W donde C - la proteína en cada tubo obtenida de la curva estándar Contenido (mg V - volumen total del extracto (ml); g) 3 Análisis de resultados 3.1 Determinación del contenido de azúcar soluble en plantas 3.1.1 Solubilidad. Curva estándar de azúcar Tabla 1: Valor de absorbancia de glucosa estándar en cada tubo de ensayo Número de tubo Contenido de glucosa (ug) Absorbancia 0 0 0 1 40 0.195 2 80 0.370 3 120 0,518 4 160 0,690 5 200 0,706 3.1.2 Solubilidad en apio, repollo y espinacas Valor de absorción de azúcar valor de absorción A1 A1 A2 A3 promedio 0,358 0,361 0,367 0,362 repollo 0,347 0,352 0,350 nombre de la muestra es espinaca 0,333 0,327 0,329 en la curva de control 3.1.3 Cálculo del contenido de azúcar soluble. contenido de azúcar = contenido de la muestra (ug) * dilución Belleza*100/{Peso de la muestra (g)*10} G/100g Muestra pesada fresca de apio Calidad del repollo/G 1,00 1,00 1,00 Valor de infiltrado 0,362 0,350 0,329 Comeon contiene azúcar/μg 80,830 78,139 73,256 diluido 100 100 100 soluns Contenido de azúcar/μg 0,8083 0,7813 0,7325 6 Se puede ver en la tabla que el contenido de azúcar soluble en el apio es el más alto, el contenido en el repollo está en el medio y el contenido de azúcar soluble en las espinacas es el más bajo.

3.2 Determinación del contenido de proteína soluble en plantas 3.2.1 Curva estándar de proteína soluble Tabla 1 Valor de absorbancia de la proteína estándar en cada tubo de ensayo Número de tubo Contenido de proteína (ug) Absorbancia 0 0 0 1 20 0,286 2 40 0,578 3 60 0,852 4 80 0,921 5 100 1,250 3.2.2 Valor de absorbancia de la proteína soluble en apio, repollo y espinacas Valor de absorción A1 A2 A3 Nombre promedio de la muestra Apio 0,095 0,102 0,097 0,098 Repollo 0,122 0,125 0,128 0,125 Espinacas 0,085 0,081 0,080 2 Según la curva estándar, se puede concluir que: 1 g de muestra de vegetales En la solución de muestra de 1 ml extraída de la muestra, el contenido de proteína de la solución de muestra de apio fue de 4,619 μg; el contenido de proteína de la solución de muestra de repollo fue de 6,761 μg; 3,349 microgramos. 3.2.3 Proteína soluble ¿Calcular el contenido de proteína en la muestra? C——Verifique el valor de la curva estándar, ug VT——El volumen total de la solución de extracción, ml Vs——La cantidad de muestra agregada durante la prueba, ml WF—— El peso fresco de la muestra, g de muestra de apio Contenido de proteínas de repollo y espinacas C (ug) 4,619 6,761 3,349 C *VT (mg/g) V *W *1000 S F Volumen total de solución de extracción VT (ml) 5,0 5,0 50. Volumen de muestra Vs (ml) al medir 1,0 1,0 1,0 Peso fresco de la muestra WF (g) 1,0 1,0 1,0 Contenido de proteína en la muestra (mg/g) 0,023 0,034 0,016 Se puede ver en la tabla que el repollo tiene el mayor contenido de azúcar soluble. el apio tiene el contenido medio y las espinacas tienen el contenido más bajo de azúcar soluble. 4 Discusión Los contenidos de azúcar soluble y proteína soluble en apio, repollo y espinacas se midieron mediante experimentos