¿Cómo inspeccionar y poner en cuarentena el virus de la mancha anular de la necrosis del ciruelo?

Identificación del huésped:

Plántulas de cerezo europeo (F12/1): En la primavera del año del injerto e inoculación, las hojas desarrollaron manchas foliares necróticas y anillos cloróticos.

Nuez de nogal (Prunus serrulatacv. Shirofugen): 2 a 3 semanas después de la germinación, aparece una necrosis marrón oscura y escarcha en el sitio injertado o en el tejido que rodea la corteza que contiene el virus.

Plántulas de melocotón (GF305): Aparecieron anillos amarillos en las hojas 3 semanas después de la inoculación en condiciones de invernadero. Las hojas de cepas muy virulentas se vuelven necróticas, apareciendo lesiones verdes o anulares en las hojas, seguidas de necrosis de nuevos brotes.

Pepino: Aparecen manchas verdes o anillos con bordes poco claros en los cotiledones 1-5 días después de la inoculación. Después de 6-8 días, las yemas terminales mueren y las plantas se vuelven enanas.

Quinoa: a los 5 a 6 días de la inoculación aparecerán manchas anulares cloróticas y manchas grises necróticas, y las hojas nuevas se deformarán tras la inoculación.

Melón y judías: aparecen manchas negras localmente y las nervaduras de las hojas en todo el cuerpo están necróticas.

Melón amargo: Aparecen manchas necróticas grises en las hojas inoculadas, con necrosis sistémica ocasional.

Huésped del marchitamiento por Fusarium: Los síntomas del marchitamiento por Verticillium aparecen en hojas inoculadas de calabaza de invierno (variedades Buttercup, Shaojuzao y Shirakawari).

Estabilidad in vitro:

① Temperatura de pasivación. 55～62℃.

②Punto final de dilución. 10-2.

③Periodo de supervivencia in vitro. 16～18h.

Detección serológica: El método ELISA es el método de detección serológica más utilizado. Las hojas nuevas y los pétalos de los brotes primaverales se detectan mejor. La epidermis de las ramas inactivas en otoño e invierno también es un buen material de prueba.

PNRSV está estrechamente relacionado serológicamente con el virus de patrón plumline de Dinamarca, pero no tiene relación serológica con el virus de patrón Shiroplumline de Cation. El virus tiene una relación serológica lejana con el virus del mosaico de la rosa y el virus del mosaico de la manzana, y no existe reactividad cruzada serológica con el virus del enanismo de la ciruela.

Biología molecular: el PNRSV de diferentes serotipos se puede detectar con éxito mediante hibridación molecular, y se han informado las secuencias de nucleótidos de varios aislados de PNRSV, por lo que se pueden diseñar cebadores específicos para la prueba de identificación viral. Helguera et al. (2001) utilizaron IC-RT-PCR anidada, que agregó un par de cebadores al fragmento de amplificación por PCR mencionado anteriormente para detectar PNRSV. En comparación con la IC-RT-PCR tradicional, mejoraron la sensibilidad y el rendimiento. El ensayo de PCR es 100 veces más sensible que la IC-RT-PCR convencional.

PNRSV presenta una gran variación molecular, con múltiples cepas y serotipos. Al comparar las secuencias del genoma de diferentes aislados, se diseñan cebadores específicos y la PCR se puede utilizar no sólo para detectar el virus sino también para identificar cepas o serotipos específicos. Por ejemplo, Hammond (1999) diseñó cebadores universales y específicos de cepa y estableció un nuevo método para la detección rápida y la diferenciación de cepas mediante PCR múltiple. La diferenciación de cepas, especialmente la identificación de cepas altamente virulentas, es muy importante en la inspección de cuarentena.

Evaluación de riesgos: El agente causante de la enfermedad, el virus de la mancha anular necrótica de la ciruela, puede atravesar el material de propagación de manzanas, melocotones, albaricoques, cerezas, ciruelas y lúpulos, así como de cerezas dulces y ácidas europeas. cerezas y cerezas de Maharashtra, ciruelas, nectarinas, frambuesas y brotes de melón cuyas semillas se extienden a largas distancias. Además de dañar plantas leñosas como manzanas, melocotones, albaricoques, cerezas, ciruelas, lúpulos y rosas, también puede infectar el algodón, el tabaco, la sandía, el melón, la calabaza, el calabacín, los frijoles, el caupí, los girasoles, la lechuga y la espuma de prado. otras plantas herbáceas, y se propagan en el campo a través de Vasatesfockeui y Longidorusmacrosoma, ampliando el rango de propagación. Provoca importantes pérdidas económicas a la producción de estos árboles frutales y cultivos. En la evaluación de riesgos, Kira tiene un valor de riesgo de 10 puntos, lo que la convierte en una plaga cuarentenaria de alto riesgo. Aunque ha ocurrido en algunas zonas de mi país, ante la gravedad de sus daños, mi país la ha incluido en la lista de plagas peligrosas de entrada fitosanitarias.

Distribución geográfica: Ampliamente distribuida en zonas templadas, en Australia, Austria, Bélgica, Bulgaria, Canadá, República Checa, Eslovaquia, Dinamarca, Francia, Alemania, Reino Unido, Hungría, India, Israel, Suecia, Italia. , Polonia, Países Bajos, México, Nueva Zelanda, Noruega, Portugal, Rumania, Sudáfrica, España, Suiza, Estados Unidos, la ex Unión Soviética, Yugoslavia y otros países. Las cerezas en algunas partes de China también se han visto afectadas por el virus.

Países y regiones en cuarentena: China, Argentina, Paraguay, Brasil, Países Bajos, Perú, Eslovaquia, Hungría, Australia, Indonesia, Perú, Reino Unido, Francia, Italia, Argelia, Islandia, Marruecos, Eslovaquia, etc.

Plantas a inspeccionar: materiales de reproducción de manzanas, melocotones, albaricoques, cerezas y ciruelas, semillas de cerezas, ciruelas, nectarinas, frambuesas y calabazas.

Medidas de cuarentena: El ingreso debe ser aprobado por la agencia provincial de cuarentena vegetal, con un límite de no más de 100 plantas, y el país exportador debe emitir un "Certificado de Cuarentena" para garantizar que no hay tal virus. Después de la entrada, el lugar de producción debe estar en cuarentena durante más de un año bajo la supervisión de la agencia local de cuarentena vegetal. Sólo después de que se confirme que no hay epidemia, se puede utilizar para reproducción o producción y plantación.