¿Cuánto tiempo se tarda en extraer el ácido nucleico microbiano?

◎La extracción del ácido nucleico microbiano de la muestra se puede completar en aproximadamente 20 minutos.

◎El ácido nucleico extraído tiene alta pureza, sin inhibidores, 1,75

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◎Fórmula única de solución de lisis, adecuada para la extracción de ácidos nucleicos microbianos de sangre, saliva, hisopos, muestras de agua y heces, especialmente adecuada para la detección molecular de infecciones microbianas en ganado.

Introducción del producto

El kit de extracción de ácido nucleico microbiano BIOG fue desarrollado por nuestro equipo de I+D basándose en una comparación exhaustiva de productos extranjeros similares de alta calidad. Está especialmente diseñado para la rápida extracción y purificación de ácidos nucleicos microbianos en muestras y es especialmente adecuado para la detección molecular de infecciones microbianas en ganado como cerdos, vacas y ovejas. Este kit utiliza una fórmula única de tampón de lisis y es adecuado para extraer ácidos nucleicos de sangre, saliva, hisopos, agua y heces. Este kit utiliza una fórmula única de solución de lisis para extraer directamente ácidos nucleicos microbianos de alta calidad de sangre completa, hisopos, saliva, muestras de agua, heces, suelo y otras muestras frescas, congeladas o viejas. La operación es simple y rápida y toma alrededor de 20. minutos. Se puede completar la extracción de ácidos nucleicos microbianos. El kit de extracción de ácidos nucleicos microbianos BIOG utiliza la última membrana de iones de alta calidad. El tampón de lisis y el eluyente se han optimizado muchas veces para eliminar la contaminación por impurezas, como proteínas, pigmentos y lípidos, al máximo. Es especialmente adecuado para microorganismos infectados. muestras como bacterias y virus de pruebas moleculares.

Pasos? (Prepare usted mismo etanol absoluto, alcohol isopropílico y tubos de centrífuga esterilizados de 1,5 ml):

1. Saque la solución de lavado y proceda de la siguiente manera:

a) Solución de lavado A: agregue 9 ml de etanol absoluto a 21 ml, agregue 18 ml de etanol absoluto a 42 ml y mezcle bien.

b) Solución de lavado B: añadir 42 ml de etanol absoluto a 18 ml; añadir 84 ml de etanol absoluto a 36 ml y mezclar bien.

c) Si hay precipitación en la solución de lavado preparada, se puede disolver a 37°C, agitar bien antes de usar.

2. Tome un tubo de centrífuga de 1,5 ml, agregue 200 μl de sangre u otras muestras, luego agregue 200 μl de solución de lisis y 40 μl de solución de digestión, agite y mezcle e incube en un baño de agua a 65 °C durante 10 minutos.

3. Añadir 150 μL de alcohol isopropílico (25% del volumen total) y mezclar uniformemente. Si queda una suspensión translúcida, no afectará a la extracción de ADN ni a los experimentos posteriores.

4. Coloque la columna cromatográfica en el tubo de recolección, transfiera la solución anterior a la columna cromatográfica, centrifugue a 12000 rpm durante 1 minuto y deseche el líquido residual en el tubo de recolección; p> 5. Vuelva a colocar la columna en el tubo de recolección, agregue 500 μL de solución de lavado A a la columna, déjela reposar durante 1 minuto, luego centrifugue a 12,000 rpm durante 1 minuto y deseche el líquido residual en el tubo de recolección; /p>

6.

6. Vuelva a colocar la columna en el tubo de recolección, agregue 500 μL de detergente B a la columna, centrifugue a 12 000 rpm durante 1 minuto y deseche el líquido residual en el tubo de recogida.

7.

7. Vuelva a colocar la columna en el tubo de recolección, agregue 500 μL de detergente B a la columna, centrifugue a 12.000 rpm durante 1 minuto, deseche el tubo de recolección de líquido residual.

8. Tome 30 µL de eluato de cada muestra (por ejemplo, 10 extractos, 300 µL de eluato), colóquelos en un tubo de centrífuga esterilizado de 1,5 ml y precaliéntelo a 65 °C.

9. Vuelva a colocar la columna en el tubo de recogida y centrifugue a 12.000 rpm durante 2 minutos para eliminar la solución de lavado residual.

10. Retire la columna del tubo de recogida y colóquela en un nuevo tubo de centrífuga estéril de 1,5 ml. Agregue 30 μL de eluyente precalentado al centro de la columna, déjelo reposar durante 2 minutos y luego centrifugue a 12.000 rpm durante 1 minuto para recolectar la solución de ácido nucleico. Utilice el ácido nucleico extraído para el siguiente experimento o guárdelo en -. 20°C.

Notas:

1. La solución de lisis contiene productos químicos irritantes. Tenga cuidado de evitar el contacto directo con la piel y evitar la inhalación.

Si la solución de lisis no se agota después de abrirla, apriete la tapa del tubo

y guárdela en un recipiente hermético.

2. El volumen de una sola muestra de sangre es generalmente de 200 μL. Si el volumen de sangre es grande, utilice el kit de extracción de ácidos nucleicos de sangre total mediana BIOG.

3. Para prevenir la contaminación por RNasa, lo mejor es utilizar guantes y mascarillas limpias y desechables durante el experimento, y utilizar recipientes tratados sin RNasa y agua ultrapura sin RNasa.

4. Si el ADN extraído no se utiliza temporalmente, se debe almacenar a -20 ℃, y el ARN se debe almacenar a -70 ℃, y se puede agregar factor de protección de ARN de manera adecuada (n.º de cat. .: 51090, normalmente 50 μl de solución de ARN (agregue 2 μl).