¿Cómo realizar un cultivo de tejidos?
(1) Desinfección de utensilios. Antes del cultivo de tejidos, la cristalería, etc. se debe limpiar con detergente en polvo y reservar. La sala de inoculación y la mesa de trabajo ultralimpia se limpiaron con alcohol al 70% y se irradiaron con luz ultravioleta. Otros utensilios también deben esterilizarse a altas temperaturas.
(2) Colección de materiales de cultura. Los materiales vegetales utilizados en el cultivo de tejidos pueden ser raíces, tallos, hojas, flores, yemas y cotiledones y en ocasiones también se pueden utilizar polen o anteras. Por lo general, se deben tomar materiales jóvenes y tiernos. Estos materiales deben permanecer frescos y tiernos cuando se introducen en el medio de cultivo; de lo contrario, el cultivo de tejido fallará.
(3) Desinfección de materiales de cultivo. Primero enjuague los materiales recolectados con agua del grifo, luego enjuáguelos con agua destilada de 2 a 3 veces, luego use una gasa esterilizada para absorber la humedad de los materiales, córtelos en trozos pequeños y sumérjalos en alcohol al 70% durante 15 a 30 segundos. Luego remoje en solución clarificada en polvo blanqueador al 30% durante 20 minutos para su desinfección y finalmente enjuague con agua esterilizada de 3 a 5 veces.
(4) Preparación de explantes. De los materiales esterilizados anteriores, use cuchillos, tijeras y pinzas esterilizadas al fuego para pelar las escamas de los cogollos, la corteza exterior de las ramitas, el endospermo de la cubierta de la semilla, etc. sobre papel de filtro esterilizado, y luego córtelos en Trozos de 0,2 a 0,5 cm de largo. Trozos pequeños (estos trozos pequeños son explantes). Durante el funcionamiento, está estrictamente prohibido tocar estos materiales con las manos.
(5) Inoculación y cultivo. Los explantes cortados se inocularon inmediatamente en medio de cultivo en condiciones estériles. Después de la inoculación, todos los tubos de ensayo y matraces cónicos deben sellarse con un algodón esterilizado y colocarse en la rejilla de cultivo de la sala de cultivo para su cultivo. Utilice lámparas fluorescentes de 12 a 16 horas al día. Mantener a 25 ℃ ± 20 ℃. También se puede utilizar un cultivo a temperatura variable, siendo la temperatura durante la noche ligeramente más baja que durante el día.