Método de extracción
1 Instrumentos y materiales
1.1 Instrumento HA121?50?05 dispositivo de extracción supercrítica (Jiangsu Nantong Huaan Supercritical Extraction Co., Ltd.), cromatógrafo de gases Shimadzu 2010 (; Kunshan Ultrasónico Instrument Co., Ltd.); planta trituradora de muestras; extractor de aceite volátil; evaporador rotatorio; balanza electrónica;
1.2 El material mint procede de Dongtai, Jiangsu. A finales de julio, se recogieron las partes aéreas, se secaron a la sombra, se cortaron en rodajas y se trituraron. Identificado como menta. Guo, investigador del Instituto de Botánica de la Academia de Ciencias de China, Jiangsu.
Mentol (Instituto Chino para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos); acetato de etilo (Shanghai Chemical Reagent Factory).
2 Métodos y resultados
2.1 Método de extracción
2.1.1 Extracción por destilación al vapor Pesar 200 g de menta triturada y colocarlos en un extractor de aceite volátil. añadir 1.000 ml de agua y extraer el aceite volátil según el método de determinación de aceite volátil del Apéndice X D de la Farmacopea China, edición de 2000. Extraer durante 6 horas y recoger el aceite de menta. Deshidratar con sulfato de sodio anhidro y filtrar con papel de filtro.
2.1.2 Extracción mediante método de remojo en frío: Pesar 20 g de menta en polvo, remojarlo 3 veces con 600 ml de éter de petróleo a temperatura ambiente y remojarlo con 200 ml de solvente durante 3 horas cada vez. los extractos y rotar. Evaporar el éter de petróleo del filtrado en un evaporador. Los siguientes pasos son los mismos que 2.1.1.
2.1.3 Extracción ultrasónica: Pesar 20 g de menta en polvo, utilizar 200 ml de éter de petróleo como disolvente y realizar la extracción ultrasónica tres veces. La frecuencia ultrasónica es de 40 kHz y el tiempo de extracción es de 30 minutos/hora. Los extractos se combinaron y el éter de petróleo del filtrado se evaporó en un rotavapor. El siguiente procesamiento es el mismo que 2.1.1.
2.1.4 Extraer 1,3 kg de menta en polvo mediante el método de CO2 supercrítico y colocarlo en el recipiente de extracción. En condiciones de presión de extracción de 9 MPa, temperatura de extracción de 50 °C y caudal de CO2 de 25 L/h, el tiempo de extracción del aceite de menta es de 65438 ± 0,5 h y el procesamiento posterior es el mismo de 2,65438 ± 0,65438 ± 0,5 h. .
2.2 Comparación del rendimiento de aceite de menta Extraiga el aceite de menta según el método anterior y calcule la tasa de aceite. El rendimiento de aceite de menta extraído mediante el método de destilación al vapor fue de 65438 ± 0,65438 ± 0,05 %, el método de remojo en frío fue de 65438 ± 0,27 %, el método ultrasónico fue de 65438 ± 0,34 % y el método de CO2 supercrítico fue de 2,43 %.
2.3 Determinación del contenido de mentol
2.3.1 Preparación de la solución de la sustancia de referencia Pesar con precisión 1,5 mg de sustancia de referencia de mentol en un matraz volumétrico de 1 ml, agregar acetato de etilo hasta la marca, agitar bien para obtener una solución de referencia con una concentración de 1,5 mg/ml.
2.3.2 Preparación de la solución de muestra Pesar con precisión una cantidad adecuada de aceite de menta extraído según el método anterior, colocarlo en un matraz volumétrico de 5 ml, agregar acetato de etilo hasta la marca, agitar bien y obtener la solución de muestra.
2.3.3 Condiciones de la cromatografía de gases ¿La columna es ZB? Columna capilar elástica de cera (30 mm × 0,25 mm, 0,25 micrones), temperatura de la columna 80 °C, temperatura constante 2 min, aumento de temperatura programado de 5 °C/min a 110 °C, mantenimiento durante 1 min, velocidad de aumento de temperatura programada desde; 3 °C/min a 65438 ±050 ℃ y se mantiene a 65438 ±0 minutos; la tasa de aumento de temperatura programada es de 6 ℃/min a 170 ℃; la temperatura de la cámara de gasificación es de 240 ℃; el gas portador es N2 de alta pureza ( 99,99%); la temperatura de detección es 240 ℃ (FID); la relación de división es 20:1.
2.3.4 Dibuje una curva estándar, dibuje con precisión 1, 2, 3, 4, 5, 6 μl de la solución de control según 2.3.1 e inyéctela en el cromatógrafo de gases para medir. área como ordenada La cantidad de muestra (μg) se utiliza como abscisa para dibujar una curva estándar y se obtiene la ecuación de regresión Y = 1e+00. Los resultados muestran que el volumen de inyección de la sustancia de referencia tiene una buena relación lineal con el área del pico en el rango de 1,5 ~ 9,0 μg
2.3.5 Experimento de estabilidad Las soluciones de muestra de aceite de menta extraídas por destilación al vapor fueron a las 0 y 2 respectivamente, 4, 6, 10 y 12 h de medición, cada inyección de 2 μl. Los resultados muestran que la desviación estándar relativa del área del pico de mentol es 65438 ± 0,26 % y se puede medir en 65438 ± 02 h.
2.3.6 Experimento de precisión: se extraen muestras de aceite de menta con vapor destilación, inyectada 6 veces, 2 μl/tiempo, con las mismas condiciones cromatográficas. Los resultados muestran que la desviación estándar relativa del pico cromatográfico de mentol es 65438 ± 0,02%.
2.3.7 Experimento de reproducibilidad: Extraer 6 muestras de aceite de menta mediante destilación al vapor y medir en paralelo. Los resultados mostraron que el contenido promedio de mentol fue 78,365438 ± 0% y la RSD fue 65438 ± 0,73%, lo que indica que la determinación de la muestra tuvo buena reproducibilidad.
2.3.8 Experimento de tasa de recuperación: pese con precisión 5 muestras de aceite de menta extraídas por destilación al vapor con contenido de mentol conocido, agregue una cantidad adecuada de sustancia de referencia de mentol según 2.3.1 para medir y calcule la tasa de recuperación. La tasa de recuperación promedio es del 97,34% y la RSD es del 2,05%.
2.3.9 Determinación del contenido de la muestra De acuerdo con las condiciones cromatográficas anteriores, determine la solución de la muestra según 2.3.2. Los resultados se muestran en la Tabla 1. Según la Tabla 1, el orden del contenido de mentol en el aceite de menta obtenido mediante los cuatro métodos de extracción es: método ultrasónico > método de remojo en frío > método de destilación al vapor > método de CO2 supercrítico. El orden de producción de mentol es: método de CO2 supercrítico > método ultrasónico > método de remojo en frío > método de destilación al vapor.
Tabla 1 Comparación del contenido de mentol en aceite de menta extraído mediante diferentes métodos de extracción (omitido)
Rendimiento de mentol (%) = rendimiento de aceite × contenido de mentol × 100 %
3 Discusión
El rendimiento de aceite y el contenido de mentol del aceite de menta extraído mediante el método de remojo en frío y el método ultrasónico son mayores que los del método de destilación al vapor. En la producción real de aceite de menta, generalmente se usa el método de destilación al vapor, porque tanto el método de remojo en frío como el método ultrasónico utilizan solventes orgánicos, que pueden causar fácilmente residuos de solventes. Además, el método de destilación al vapor es relativamente sencillo de operar y de bajo costo, por lo que se usa ampliamente en la producción.
Entre los cuatro métodos de extracción, la extracción con CO2 supercrítico del aceite de menta tiene la tasa de extracción más alta. Esto se debe a que el proceso de extracción de CO2 supercrítico se lleva a cabo en un sistema cerrado, la temperatura de funcionamiento es baja, los terpenos no se pierden fácilmente, los componentes térmicamente inestables y los componentes que se oxidan fácilmente no se destruyen y también se extraen algunos componentes de alto punto de ebullición.
La extracción del aceite de menta no sólo debe considerar el contenido de los principales principios activos, sino también su rendimiento. En la extracción con CO2 supercrítico, el contenido de mentol en el aceite de menta es bajo, pero debido al alto rendimiento de aceite, el rendimiento de mentol en el aceite de menta es mayor que otros métodos de extracción.
La extracción con CO2 supercrítico del aceite de menta tiene un alto rendimiento de aceite y mentol. Tiene las ventajas de baja temperatura de funcionamiento, no toxicidad, alta eficiencia y operación simple, y puede garantizar la estabilidad y calidad de los ingredientes activos. y productos, no contamina el medio ambiente. Por lo tanto, entre los cuatro métodos de extracción de aceite de menta, la extracción con CO2 supercrítico es el método más ideal.
Referencia
[1]Comité Nacional de Farmacopea. Farmacopea china, parte 1. Editorial Médica del Pueblo de Beijing 2000: 6097.
[2]Wei,. ¿Análisis por cromatografía de gases de los componentes químicos del aceite volátil de menta silvestre? Espectrometría de masas [J]. Revista de la Universidad Normal de Yantai (edición de ciencias naturales), 2003, 19 (2): 116.
An Qiurong, Guo Zhifeng. Estudio comparativo sobre los componentes volátiles del aceite de menta en verano y otoño [J]. Journal of Hebei University (Natural Science Edition), 2000, 20 (4): 351.
[4]Liu Jinrong, Li Ping. Determinación de componentes químicos de tres aceites volátiles de menta silvestre [J]. Journal of Shihezi Medical College, 1995, 17 (1): 16.