La interfaz para la extracción de PBMC y la adición de sangre no está clara
1 y PBMC son en su mayoría linfocitos, incluidas las células B y las células T, y las células T CD3 representan la gran mayoría de los linfocitos (45-70). Estas células T se encuentran en un estado ingenuo, es decir, han madurado pero no han sido estimuladas por antígenos. En personas normales, sólo una proporción muy pequeña de células T vírgenes se activan mediante el reconocimiento de antígenos. Las mismas células B también se encuentran en un estado ingenuo. En comparación con los linfocitos, la proporción de monocitos es de 10 a 30 y se convertirán en células dendríticas (DC) o macrófagos después de ser estimulados. La proporción de células madre es muy baja, sólo 0,1-0,2, por lo que es difícil aislarlas a partir de muestras de sangre completa.
2. Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se refieren a las células mononucleares de la sangre periférica, que incluyen linfocitos, monocitos, células dendríticas (DC) y un pequeño número de otras células. Las PBMC se pueden obtener de la sangre periférica de donantes humanos o animales sanos mediante centrifugación en gradiente de densidad de Ficoll, clasificación de perlas magnéticas y otros pasos, e incluyen principalmente linfocitos y monocitos.
3. Ficoll es un polímero de sacarosa, neutro, con un peso molecular medio de 400.000. Cuando la densidad es de 1,2 g/ml, no excede la presión osmótica fisiológica normal y no atraviesa la membrana biológica. La proporción de glóbulos rojos y granulocitos es grande y se hundirán hasta el fondo del tubo después de la centrifugación. La proporción de linfocitos y monocitos es menor o igual que la gravedad específica del líquido estratificado y flotarán en el; superficie del líquido estratificado después de la centrifugación También puede haber una pequeña cantidad de células suspendidas en la superficie del líquido estratificado en el líquido en capas. Las células mononucleares se pueden aislar de la sangre periférica adsorbiendo células de la superficie de un líquido estratificado.