Cultivo de micoplasma
La mayoría de ellos son anaeróbicos facultativos. Cuando se añade un 5% de CO2 durante la separación inicial, algunas cepas crecen mejor. Crece lentamente Cuando se incuba en un medio sólido con menos contenido de agar durante 2 a 3 días, aparecerá una colonia típica "parecida a un huevo escalfado": redonda (de 10 a 16 µm de diámetro), con un núcleo grueso y una capa delgada de color. partículas transparentes a su alrededor. Además, el micoplasma también puede crecer en la membrana corioalantoidea de embriones de pollo o en células cultivadas. Hay varias formas de reproducción, principalmente reproducción en díada, pero también fractura, ramificación y gemación. Esto se debe a la pérdida de la pared celular durante la división de Gai y las dos células hijas tienen el mismo tamaño. Al mismo tiempo, la división del micoplasma no está sincronizada con la replicación del ADN y se pueden formar filamentos multinucleados.
La contaminación por micoplasma de cultivos celulares (especialmente células pasadas) es un problema mundial. Estudios nacionales y extranjeros han demostrado que más del 95% de ellos son de los siguientes cuatro tipos de micoplasmas: Mycoplasma oralis, Mycoplasma ajenii, Mycoplasma hyorhinis y Mycoplasma reinhardtii, todos de origen bovino. Los anteriores son los grupos de micoplasmas más comunes que contaminan los cultivos celulares, pero existen muchos tipos de micoplasmas que pueden contaminar las células. Estudios extranjeros han demostrado que alrededor de 20 tipos de micoplasmas pueden contaminar las células y que algunas líneas celulares pueden contaminar más de dos tipos de micoplasmas al mismo tiempo. Las fuentes de contaminación por micoplasmas incluyen la contaminación en el entorno de trabajo, la contaminación por parte del propio operador (algunos micoplasmas son flora normal en el cuerpo humano), la contaminación del medio de cultivo, la contaminación cruzada causada por células contaminadas por micoplasmas, la contaminación causada por equipos experimentales. y el uso de contaminación del tejido u órgano original a partir del cual se prepararon las células.
En el trabajo de cultivo de células tisulares, prevenimos principalmente la contaminación por micoplasma desde los siguientes aspectos: controlar la contaminación ambiental; las operaciones experimentales estrictas; los medios y equipos de cultivo celular deben ser estériles; agregar cantidades adecuadas de antibióticos al medio de cultivo celular; . Después de que el micoplasma contamina las células, especialmente las líneas celulares importantes, es necesario eliminarlo. Los métodos comúnmente utilizados incluyen tratamiento con antibióticos, tratamiento con antisuero, antibióticos más antisuero y terapia complementaria. La característica estructural más destacada del micoplasma es la falta de pared celular. En general, es completamente insensible a los antibióticos que actúan sobre la biosíntesis de la pared celular, como los β-lactámicos, la vancomicina, etc. A menudo son resistentes a la polimicina, la rifampicina y las sulfonamidas. Los micoplasmas a veces se denominan Bacteroidetes. Sin pared celular, en su mayoría irregulares, esféricas, filamentosas, ramificadas, parásitas o saprofitas. Generalmente, los objetos de infracción son animales y plantas, que pueden provocar numerosas enfermedades.
El micoplasma generalmente es difícil de teñir, pero la tinción de Giemsa es muy clara y la tinción de Gram es negativa. El micoplasma puede crecer en las membranas corioalantoideas de los pollos o en cultivos celulares. El cultivo en medios de cultivo requiere mayores nutrientes que las bacterias. Debido a que no tiene pared celular, no es susceptible a los antibióticos que afectan la síntesis de la pared celular, como la penicilina. Los antibióticos que actúan sobre los ribosomas, como eritromicina, tetraciclina, kanamicina, estreptomicina, cloranfenicol, etc., pueden inhibir o afectar la síntesis de proteínas del micoplasma y tener el efecto de matar el micoplasma. Mycoplasma tiene poca resistencia al calor. Por lo general, se puede inactivar a 55 ℃ durante 15 minutos. El Lysol mata fácilmente el ácido carbónico. Al agregar urea al medio de cultivo y usar sulfato de manganeso como indicador, es fácil distinguir Mycoplasma hominis de otros micoplasmas. Recogida de muestras
Hombre:
Inserte un hisopo de algodón estéril unos 2 cm en la uretra, gírelo, manténgalo quieto durante unos segundos y luego tome una muestra.
Mujer:
Limpie la mucosidad de la abertura cervical, inserte el hisopo estéril 1-2 cm en el canal cervical y gírelo para tomar una muestra.
Se pueden utilizar como muestras líquido prostático, semen y sedimento centrífugo de orina.
Vacunación
Lavar la muestra en medio líquido Uu o Mh, o filtrar con un filtro bacteriano e inocular.