¿Cuáles son los métodos de uso y precauciones para la cromatografía líquida?

Pasos operativos de la cromatografía líquida de alta resolución: 1). Filtre la fase móvil y seleccione diferentes membranas filtrantes según sea necesario. 2)． Desgasifique ultrasónicamente la fase móvil después de la filtración por succión durante 10 a 20 minutos. 3)． Abra la estación de trabajo de HPLC (incluido el software de computadora y el cromatógrafo), conecte la tubería de fase móvil y conecte el sistema de detección. 4)． Ingrese al menú principal de la interfaz de control de HPLC y haga clic en manual para ingresar al menú manual. 5)． Si no se ha utilizado durante un período de tiempo, o si se utiliza una nueva fase móvil, primero se debe lavar la bomba y la válvula de inyección. Para lavar la bomba, extraiga directamente de la salida de la bomba con una aguja. Para lavar la válvula de inyección, primero debe hacer clic en purgar en el menú manual y luego hacer clic en iniciar. La velocidad durante el lavado no debe exceder los 10 ml/min. 6)． Ajuste el caudal. Cuando utilice una nueva fase móvil por primera vez, puede probar la presión primero. Cuanto mayor sea el caudal, mayor será la presión. Haga clic en lesionar, seleccione el caudal apropiado, haga clic en, tome la línea de base y observe la situación de referencia.

7)． Diseñar métodos de alias. Haga clic en el archivo y seleccione seleccionar usuarios y métodos para seleccionar varios métodos de alias existentes. Si necesita crear un nuevo método, haga clic en nuevo método. Seleccione los accesorios requeridos, incluyendo válvulas de inyección, bombas, detectores, etc., que varían según sus necesidades. Después de seleccionar, haga clic en protocolo. Un método de muestreo completo debe incluir: a. Flujo constante antes de la inyección, generalmente de 2 a 5 minutos; b. Conversión de carga-inyección de la válvula de inyección, que varía según las diferentes muestras. 8)． Operaciones de inyección y postinyección. Seleccione el método de alias y haga clic en iniciar. Inyección, todas las muestras deben filtrarse. Una vez completado el método, haga clic en posejecución para registrar datos y marcarlos. Después de que se hayan pasado todas las muestras, utilice el método anterior para recorrer una sección de la línea base y eliminar el residuo restante. 9)． Al apagar, apague primero la computadora y luego el cromatógrafo de líquidos. 10)． Rellenar el libro de registro y hacerlo firmar por el responsable.

Precauciones para el uso del cromatógrafo líquido de alta resolución:

1. Cuando la bomba funciona normalmente, la presión de la columna debe ser estable bajo la premisa de que la fase móvil y el caudal permanecen sin cambios. Por supuesto, al cambiar Es normal que la presión cambie durante la fase móvil. En circunstancias normales, si la presión de la columna aumenta, se debe básicamente al uso prolongado de la columna (solo se reemplaza la columna). disminuye repentinamente en circunstancias normales, puede deberse a (1) la junta. Cuando hay fugas, el método adoptado es verificar con papel de filtro. Si hay fugas, apriételo con una llave. Si no hay fugas, puede ser (2) Hay burbujas en el tubo blanco, lo que impide que la fase móvil entre en la bomba. El método adoptado es eliminar las burbujas. Al descargar: primero PARAR la bomba - abrir el escape. válvula - presione el botón PURGA (Lavado rápido) - espere a que se descarguen las burbujas, detenga la bomba primero - apriete la válvula de escape y no invierta los pasos.

2. Cuando la bomba funciona normalmente, la presión máxima no debe exceder los 200 KG. Por lo tanto, después de abrir la bomba, puede ajustar la presión máxima de la bomba a 200 KG. excede el límite superior, emitirá una alarma y se apagará automáticamente. Es mejor no usar el caudal más de 1 ML/MIN, si la presión excede los 200 KG durante el uso, se recomienda ajustar el caudal a un punto más bajo. reduzca la presión (cuando la columna es normal). Si la presión aumenta debido al uso prolongado de la columna, se recomienda reemplazar la columna (porque la cromatografía es un material consumible que debe reemplazarse después de un uso prolongado). El reemplazo se basa principalmente en la salida máxima anormal de la columna cromatográfica o la presión de la columna es demasiado alta). 3. Cuando la bomba esté funcionando normalmente, agregue de 2 a 3 gotas de aceite lubricante al orificio de llenado de aceite en promedio cada 15 días aproximadamente. 4. Si hay sales o ácidos en la fase móvil, después de completar el experimento, lave la columna con 95% de agua bidestilada y 5% de metanol durante aproximadamente 40 minutos, y luego lávela con metanol puro durante aproximadamente 30 minutos antes de apagarla. . Si continúas haciendo experimentos al día siguiente y todavía quedan sales o ácidos en la fase móvil, lo mejor es mezclar 95% de agua bidestilada y 5% de metanol durante 20 minutos antes de usar la fase móvil. Si la fase móvil contiene sólo metanol, agua y acetonitrilo.

Después de completar el experimento, no es necesario enjuagar con 95% de agua bidestilada y 5% de metanol. Puede enjuagar directamente con metanol puro durante 30 minutos y luego apagar. 5. No exceda el rango de valores de PH resistente a los ácidos de 3-8 de la columna cromatográfica C18 cuando la use. 6. Cuando el instrumento no se utilice durante un período prolongado, asegúrese de remojar el cabezal del filtro en metanol y enciéndalo una vez cada medio mes. Si la bomba no puede bombear líquido al arrancar, puede abrir la válvula de escape y presionar PURGA. para enjuagar rápidamente. 7. Al ajustar el dispositivo de contrapresión, tenga cuidado de esperar hasta que salga el líquido antes de ajustarlo. Generalmente, ajústelo a 8-10 KG. Por ejemplo, si la pantalla de la bomba muestra una presión de columna de 50 KG, agregue 10 KG. una presión de columna de 60 KG. Luego apriete la tuerca de bloqueo. 8. Secuencia de apagado del cromatógrafo: Puede apagar el detector directamente al limpiar el recorrido del líquido. Después de la limpieza, presione DETENER para detener la bomba y luego apague la alimentación. No está permitido apagarlo directamente.