¿Qué volumen de células se requiere para detectar la apoptosis mediante citometría de flujo?
1. Recoja las células (aproximadamente (1~5) × 10
6 células/ml), centrifugue a 500-1000 r/min durante 5 minutos
y deseche el medio de cultivo. .
Lavar una vez con 2,3 ml de PBS.
3. Centrifugue el PBS, agregue etanol 70
enfriado con hielo para fijar, 4 ℃, 1-2 horas.
4. Centrifugar y desechar el fijador, y resuspender en 3 ml de PBS durante 5
minutos. Filtrar una vez a través de un tamiz de malla 400, luego centrifugar a 500-10 r/min durante 5 minutos y desechar el PBS.
6. Teñir con 1 ml de solución de tinción PI y mantener en oscuridad a 4°C durante 30
7 horas.
6. Teñir con 1 ml de solución de tinción PI y mantener en oscuridad a 4°C durante 30 minutos.