Solicitando el proceso de métodos de prueba química para aditivos alimentarios

Los conservantes se refieren a sustancias que pueden evitar que los alimentos se echen a perder y se deterioren, inhiben la reproducción de microorganismos en los alimentos y extienden la vida útil de los alimentos. En la actualidad, las principales variedades permitidas para su uso en mi país son el ácido benzoico y su sal sódica, el ácido sórbico y su sal potásica, el parahidroxibenzoato de etilo y propilo, el propionato sódico, el propionato cálcico, el ácido deshidroacético, etc. 1 Determinación de ácido benzoico y benzoato de sodio El ácido benzoico y el benzoato de sodio son uno de los principales conservantes utilizados actualmente en mi país. Es un conservante de tipo ácido y tiene mejor efecto conservante en condiciones ácidas. Es especialmente adecuado para alimentos ácidos (pH 4,5~5). Las "Normas de higiene para el uso de aditivos alimentarios" de mi país (GB2760-1996) estipulan que la cantidad máxima de uso de ácido benzoico y benzoato de sodio en bebidas carbonatadas es de 0,2 g/kg, encurtidos, encurtidos, conservas, vinagre y mermeladas bajos en sal. (excluidos los alimentos enlatados), bebidas de frutas y jugos concentrados de frutas y verduras envasados ​​en plástico, la cantidad máxima de uso es de 2 g/kg (calculado como ácido benzoico). 1.1 Método de titulación ácido-base 1.1.1 Principio: agregar una solución saturada de cloruro de sodio a la muestra, realizar la extracción en condiciones alcalinas, separar proteínas, grasas, etc., luego acidificar, extraer el ácido benzoico de la muestra con éter y luego el éter. Se evapora, se disuelve en una mezcla neutra de éter y alcohol y finalmente se titula con una solución alcalina estándar. 1.1.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumentos ① Bureta básica. ②Vaso de precipitados de 300 ml. ③Matraz aforado de 250ml. ④Embudo de decantación de 500ml. ⑤Caja de baño de agua. ⑥Secador de pelo. ⑦Balance analítico. ⑧ Matraz Erlenmeyer. (2) Reactivos ① Éter puro: colocar el éter en una botella de destilación, destilar en un baño de agua y recoger la parte del destilado a 35 °C. ② Ácido clorhídrico (6mol/L). ③Solución de hidróxido de sodio (100 g/L): Pese con precisión 100 g de hidróxido de sodio en un vaso pequeño, disuélvalo con una pequeña cantidad de agua destilada, luego transfiéralo a un matraz volumétrico de 1000 ml y ajuste el volumen hasta la marca. ④Solución saturada de cloruro de sodio. ⑤Cloruro de sodio puro. ⑥Etanol neutro al 95%: agregue unas gotas de indicador de fenolftaleína al etanol al 95% y neutralícelo con una solución de hidróxido de sodio hasta que se vuelva rojizo. ⑦ Mezcla de éter de alcohol neutro: Mezcle éter dietílico y etanol en volúmenes iguales a 1:1, use fenolftaleína como indicador y neutralice con hidróxido de sodio hasta que adquiera un color rojizo. ⑧Indicador de fenolftaleína (solución de etanol al 1%): Disolver 1 g de fenolftaleína en 100 ml de etanol neutro. ⑨Solución estándar de hidróxido de sodio (0,05 mol/L): Pese aproximadamente 3 g de hidróxido de sodio puro, agregue una pequeña cantidad de agua destilada para disolver la parte de la superficie, deseche esta parte de la solución y luego hierva el hidróxido de sodio restante (aproximadamente 2 g). con Disolver en agua destilada post-enfriada y diluir a 1000 ml, y calibrar su concentración según el siguiente método. 1.1.3 Pasos de operación (1) Procesamiento de la muestra ① Muestra sólida o semisólida: Pesar 100 g de la muestra triturada y colocarla en un matraz volumétrico de 250 ml, agregar 300 ml de agua destilada, agregar cloruro de sodio de grado analítico hasta que sea insoluble (hacer (si está saturado), luego use una solución de hidróxido de sodio de 100 g/L para alcalinizarlo (prueba del papel de tornasol), agite bien, agregue una solución saturada de cloruro de sodio hasta la marca, déjelo por 2 horas (siga agitando), filtre y deseche el primero. 10 ml de filtrado, recoger el filtrado para medirlo. ② Muestras que contienen alcohol: Tome 250 ml de la muestra, agregue 100 g/L de solución de hidróxido de sodio para alcalinizarla, colóquela en un baño de agua para que se evapore a aproximadamente 100 ml, transfiérala a un matraz volumétrico de 250 ml, agregue 30 g de cloruro de sodio. Agite para disolver, agregue una solución saturada de cloruro de sodio hasta la marca, agite bien, déjelo durante 2 horas (siga agitando), filtre y tome el filtrado para medir. ③ Muestras que contienen más grasa: Después de prepararlas con el método anterior, agregue una solución de hidróxido de sodio al filtrado para alcalinizarlo, agregue de 20 a 50 ml de éter para extraer, agite durante 3 minutos, deje reposar y separe en capas, y el La solución se utilizará para la medición. (2) Extraiga y extraiga 100 ml del filtrado de muestra preparado anteriormente, transfiéralo a un embudo de decantación de 250 ml y agregue 6 mol/L de ácido clorhídrico hasta que se vuelva ácido (prueba del papel tornasol). Agregue 3 ml de ácido clorhídrico (6 mol/L) y luego use 40, 30 y 30 ml de éter puro en secuencia y extraiga cuidadosamente usando el método de rotación. Agite durante no menos de 5 minutos cada vez. Después de dejar reposar para la separación, mover el extracto a otro embudo de decantación de 250 ml (las capas de éter extraídas tres veces se amplían todas en este embudo de decantación).

Lavar el extracto etéreo con agua destilada, 10 ml cada vez, hasta que el lavado final ya no sea ácido (prueba del papel tornasol). Colocar el extracto etéreo en un matraz cónico y recuperar el éter en un baño de agua a 40-45°C. Cuando solo quede una pequeña cantidad de éter, deje de reciclar y seque el éter restante con un ventilador. (3) Titular el extracto añadiendo 30 ml de una mezcla de éter de alcohol neutro, 10 ml de agua destilada, 3 gotas de indicador de fenolftaleína y una solución estándar de hidróxido de sodio de 0,05 mol/L hasta que esté ligeramente rojo. 4) Cálculo de resultados 1.2 Cromatografía líquida de alta resolución Este método se puede utilizar para la determinación de ácido benzoico y ácido sórbico al mismo tiempo. 1.2.1 Principio: La muestra se calienta para eliminar el dióxido de carbono y el etanol, el pH se ajusta a un valor casi neutro, se filtra y luego se introduce en un cromatógrafo líquido de alto rendimiento. Después de la separación mediante cromatografía de fase inversa, se realiza el análisis cualitativo y cuantitativo. basado en el tiempo de retención y el área del pico. 1.2.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumento Cromatógrafo líquido de alta resolución (con detector UV). (2) Reactivos ①Metanol: grado puro, filtrado a través de una membrana (0,5 μm). ② Solución diluida de amoníaco (1 1): Mezcle amoníaco y agua en volúmenes iguales. ③Solución de acetato de amonio (0,02 mol/L): Pesar 1,54 g de acetato de amonio, añadir agua hasta 1000 ml, disolver y filtrar a través de una membrana filtrante (0,45 μm). ④Solución de bicarbonato de sodio (20 g/L): Pese 2 g de bicarbonato de sodio (puro de excelente calidad), agregue agua hasta 100 ml, agite para disolver. ⑤ Solución madre estándar de ácido benzoico: Pese con precisión 0,1000 g de ácido benzoico, agregue 5 ml de solución de bicarbonato de sodio (20 g/L), caliente para disolver, transfiera a un matraz volumétrico de 100 ml, agregue agua para completar el volumen a 100 ml y agite bien. . Esta solución contiene 1 mg de ácido benzoico por ml. ⑥Solución madre estándar de ácido sórbico: Pese con precisión 0,1000 g de ácido sórbico, agregue 5 ml de solución de bicarbonato de sodio (20 g/L), caliente para disolver, transfiera a un matraz volumétrico de 100 ml, agregue agua para completar el volumen a 100 ml y agite bien. Esta solución contiene 1 mg de ácido sórbico por mililitro. ⑦ Solución mixta estándar de ácido benzoico y ácido sórbico: Tome 10,0 ml de solución madre estándar de ácido benzoico y ácido sórbico, colóquelos en un matraz volumétrico de 100 ml y agregue agua hasta la marca. Esta solución contiene 0,1 mg/ml de ácido benzoico y ácido sórbico y se filtra a través de una membrana filtrante (0,45 μm). 1.2.3 Pasos de operación (1) Procesamiento de la muestra ① Agua con gas: Pese 5,00 ~ 10,0 g de muestra, colóquela en un vaso de precipitados pequeño, revuelva a temperatura tibia para eliminar el dióxido de carbono y ajuste el pH a aproximadamente 7 con agua con amoníaco (1 1). Agregue agua para ajustar el volumen a 10 ~ 20 ml y filtre a través de una membrana de filtro (0,45 μm). ②Jugo: Pesar 5,00~10,0 g de muestra, ajustar el pH a aproximadamente 7 con agua con amoníaco (1 1), agregar agua al volumen apropiado, centrifugar y precipitar, y filtrar el sobrenadante a través de una membrana de filtro (0,45 μm). ③ Preparación del vino: Pesar 10,0 g de muestra, ponerlos en un vaso de precipitados pequeño, calentarlo en un baño de agua para eliminar el etanol, ajustar el pH a aproximadamente 7 con agua con amoníaco (1 1), agregar agua para completarlo hasta un volumen apropiado y filtrarlo a través de una membrana filtrante (0,45 μm). (2) Condiciones de referencia para el análisis de cromatografía líquida de alta resolución ①Columna: YWG-C18 4,6 mm × 150 mm 5 μm u otro modelo de columna C18. ②Fase móvil: solución de acetato de metanol y amonio (0,02 mol/L) (5 95). ③Caudal: 1,0 ml/min. ④Volumen de inyección: 10 μL. ⑤Detector: detector UV, longitud de onda 230 nm, sensibilidad 0,2 AUFS. Cualitativo basado en el tiempo de retención y cuantitativo utilizando el método de área de pico estándar externo. 1.2.4 En la fórmula de cálculo del resultado: Volumen total de diluyente de muestra, ml; masa de la muestra, g. 2 Determinación de ácido sórbico y sorbato de potasio El ácido sórbico y el sorbato de potasio son conservantes seguros reconocidos internacionalmente y se han utilizado ampliamente en muchos países y regiones.

las "Normas de higiene para el uso de aditivos alimentarios" de mi país (GB2760-1996) estipulan que el límite máximo de uso de ácido sórbico y sorbato de potasio cuando se utilizan en productos cárnicos, pescado y aves es de 0,075 g/kg para frutas, verduras, y las bebidas carbonatadas, el límite máximo es de 0,2 g/kg; las tripas de colágeno, los encurtidos bajos en sal, las conservas, las bebidas de frutas, las gelatinas, etc. son de 0,5 g/kg y el vino de frutas es de 0,6 g/kg de fruta concentrada; y los jugos de vegetales, gomitas, productos de pescado seco, productos instantáneos de soya, pasteles, pan, bebidas con bacterias del ácido láctico, etc. son 1,0 g/kg. Cuando se utilizan ácido sórbico y sorbato de potasio al mismo tiempo, no se debe exceder la cantidad máxima de uso basada en ácido sórbico. 2.1 Principio del método colorimétrico del ácido tiobarbitúrico 2.1.1 Utiliza ácido sórbico y sus sales extraídas de la muestra para producir malondialdehído mediante la oxidación de ácido sulfúrico y dicromato de potasio y azufre. La acción del ácido barbitúrico produce un compuesto rojo, la profundidad de. el cual es proporcional a la concentración de malondialdehído, y tiene máxima absorción a una longitud de onda de 530nm, lo cual se ajusta a la ley de Beer, por lo que puede medirse mediante colorimetría. 2.1.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumentos ① Espectrofotómetro modelo 721. ②Triturador de pañuelos. ③Tubo colorimétrico de 10ml. (2) Reactivos ① Solución de ácido tiobarbitúrico: Pese con precisión 0,5 g de ácido tiobarbitúrico en un matraz volumétrico de 100 ml, agregue 20 ml de agua destilada, luego agregue 10 ml de solución de hidróxido de sodio (1 mol/L) y agite bien de manera uniforme. Después de que esté completamente disuelto, agregue 11 ml de ácido clorhídrico (1 mol/L) y diluya hasta la marca con agua. Esta solución debe prepararse recién antes de su uso y es mejor usarla dentro de las 6 horas posteriores a su preparación. ②Mezcla de dicromato de potasio y ácido sulfúrico: mezcle 0,1 mol/l de dicromato de potasio y 0,15 mol/l de ácido sulfúrico en una proporción de 1:1 para preparar. ③Solución estándar de sorbato de potasio: Pese con precisión 250 mg de sorbato de potasio en un matraz aforado de 250 ml, disuélvalo en agua destilada y diluya hasta la marca para convertirla en una solución estándar de sorbato de potasio de 1 mg/ml. ④Solución estándar de sorbato de potasio: transfiera con precisión 25 ml de solución estándar de sorbato de potasio a un matraz aforado de 250 ml, diluya hasta la marca y agite bien para convertirla en una solución estándar de sorbato de potasio de 0,1 mg/ml. 2.1.3 Pasos de la operación (1) Procesamiento de la muestra: Pesar 100 g de muestra, agregar 200 ml de agua destilada y triturar hasta obtener un homogeneizado en un triturador de tejidos. Pesar 100 g de este homogeneizado, añadir 200 ml de agua destilada y continuar triturando durante 1 minuto. Pesar 10 g en un volumen de 250 ml y agitar uniformemente, filtrar y reservar. (2) Para dibujar la curva estándar de sorbato de potasio, tome 0,0, 2,0, 4,0, 6,0, 8,0 y 10,0 ml de solución estándar de sorbato de potasio en un matraz volumétrico de 200 ml y diluya a volumen con agua destilada (equivalente a 0,0, 1,0 , 2,0 y 10,0 ml, respectivamente). Luego extraiga 2,0 ml en el tubo colorimétrico de 10 ml correspondiente, agregue 2,0 ml de solución de dicromato de potasio y ácido sulfúrico, caliente en un baño de agua a 100 °C durante 7 minutos, agregue inmediatamente 2,0 ml de solución de ácido tiobarbitúrico y continúe calentando durante 10 minutos. Enfríelo inmediatamente y rápidamente con agua fría. Mida la absorbancia a 530 nm en un espectrofotómetro y dibuje una curva estándar. (3) Medición de la muestra: Coloque 2 ml de la solución de tratamiento de la muestra en un tubo colorimétrico de 10 ml. Siga los procedimientos operativos para dibujar la curva estándar, comenzando con "Agregar 2,0 ml de solución de dicromato de potasio y ácido sulfúrico" y mida. a 530 nm en el espectrofotómetro, encuentre la concentración correspondiente a partir de la curva estándar. 2.1.4 En la fórmula de cálculo de los resultados: X1: el contenido de sorbato de potasio en la muestra, g/kg ml; m: la masa del homogeneizado equivalente a la muestra, g; utilizado para colorimetría, ml; 250: volumen total de la solución de tratamiento de muestra, ml 1,34: coeficiente de sorbato de potasio convertido en ácido sórbico.

2.2 Espectrofotometría UV 2.2.1 Principio Después de extraer la muestra con cloroformo (cloroformo), se agrega bicarbonato de sodio para hacer que el ácido sórbico forme sorbato de sodio y se disuelva en la solución acuosa. La solución acuosa de sorbato de sodio puro tiene una absorción máxima a 254 nm y su contenido se puede medir midiendo la absorbancia con un espectrofotómetro UV. 2.2.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumentos ① Espectrofotómetro UV. ②Triturador de pañuelos. (2) Reactivos ① Cloroformo: Extraer dos veces con bicarbonato de sodio al 50% (0,5 mol/L) por volumen de cloroformo, luego secar con sulfato de sodio anhidro, filtrar y reservar. ②0,5 mol/L de bicarbonato de sodio: Pese 21 g de bicarbonato de sodio en un vaso de precipitados pequeño, agregue una pequeña cantidad de agua destilada para disolver, transfiera a un matraz volumétrico de 500 ml, agregue agua para ajustar a la marca. ③0,3mol/L de bicarbonato de sodio. ④Solución estándar de ácido sórbico: Pese con precisión 250 mg de ácido sórbico y ajuste el volumen a 250 ml con 0,3 mol/L de bicarbonato de sodio. ⑤Solución estándar de ácido sórbico: Tome con precisión 25,00 ml de solución estándar de ácido sórbico y utilice 0,3 mol/L de bicarbonato de sodio. el volumen a 250 ml, que es la solución estándar de 100 μg/ml. 2.2.3 Pasos de la operación (1) Procesamiento de la muestra: Pesar 50,0 g de muestra, agregar 450 ml de agua destilada a un triturador de tejidos y triturar durante 5 minutos para homogeneizar. Pesar 10,0 g de este homogeneizado en un matraz aforado de 50 ml y completar con agua. Pipetear 10 ml de esta solución en un embudo de decantación de 250 ml y extraer con 100 ml de cloroformo durante 1 min. Dejar reposar para formar capas. Dividir la capa de cloroformo en un matraz Erlenmeyer de 125 ml, añadir 5 g de sulfato de sodio anhidro, agitar y dejar reposar. (2) Dibujo de la curva estándar: tomar 0,0, 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0 ml de solución estándar de ácido sórbico en un matraz volumétrico de 100 ml y diluir hasta el volumen con 0,3 mol/l de bicarbonato de sodio (equivalente a 0,0, 1,0, respectivamente). ), 2,0, 3,0, 4,0, 5,0 μg/ml de ácido sórbico). Mida la absorbancia a 254 nm en un espectrofotómetro UV, dibuje una curva estándar con la concentración en abscisas y la absorbancia en ordenadas. (3) Determinación de la muestra: Pipetear 50 ml del extracto cloroformo de la muestra en un embudo de decantación de 125 ml y extraer con 25 ml de bicarbonato de sodio (0,3 mol/L) durante 1 min. Después de dejar separar, deseche con cuidado la capa de cloroformo. La absorbancia de la solución del extracto de bicarbonato de sodio se midió a 254 nm en un espectrofotómetro UV. Encuentre el contenido de ácido sórbico correspondiente a partir de la curva estándar. 2.2.4 Fórmula de cálculo del resultado: X—contenido de ácido sórbico. g/kg m1: el contenido de ácido sórbico en la solución de prueba, mg/ml; V1: el volumen total del extracto de bicarbonato de sodio de la muestra, ml; V2: el volumen del extracto de cloroformo de la muestra, ml; V3: extracción con cloroformo de la muestra Volumen total del líquido, ml m: el extracto de agua de la muestra utilizado para la medición es equivalente a la masa de la muestra, g. 2.3 Cromatografía de gases 2.3.1 Principio Después de acidificar la muestra, el ácido sórbico y el ácido benzoico se extraen con éter y luego se separan y miden usando un cromatógrafo de gases con un detector de ionización de llama de hidrógeno, y luego se comparan y cuantifican con la serie estándar. 2.3.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumentos Cromatógrafo de gases (con detector de ionización de llama de hidrógeno). (2) Reactivos ① Éter dietílico: no contiene exceso de óxidos. ② Éter de petróleo: rango de ebullición 30 ~ 60 ℃. ③ Ácido clorhídrico. ④Sulfato de sodio anhidro. ⑤ Ácido clorhídrico (1:1): Tome 100 ml de ácido clorhídrico, agréguelos y diluya a 200 ml. ⑥Solución ácida de cloruro de sodio (40 g/L): agregue una pequeña cantidad de ácido clorhídrico (1:1) a la solución de cloruro de sodio (40 g/L) para acidificarla. ⑦Solución madre estándar de ácido sórbico y ácido benzoico: Pesar con precisión 0,2000 g de cada uno de ácido sórbico y ácido benzoico, colocarlos en un matraz volumétrico de 100 ml, disolverlos con un disolvente mixto de éter de petróleo y éter dietílico (3:1) y diluir hasta la marca. 1 ml de esta solución La solución equivale a 200 mg de ácido sórbico o ácido benzoico. ⑧Solución estándar de ácido sórbico y ácido benzoico: tomar una cantidad adecuada de solución estándar de ácido sórbico y ácido benzoico y diluirla con un disolvente mixto de éter de petróleo y éter dietílico (3 1) hasta el equivalente de 50, 100, 150, 200, 250 mg de ácido sórbico por ml de ácido o ácido benzoico.

2.3.3 Pasos de la operación (1) Procesamiento de la muestra: Pese 2,50 g de la muestra que se ha mezclado uniformemente con anticipación, colóquela en una probeta graduada de 25 ml con tapón, agregue 0,5 ml de ácido clorhídrico (1:1) para acidificar. y extraiga con 15 ml y 10 ml de éter en secuencia, cada vez. Después de agitar durante 1 minuto, succione el extracto etéreo superior en otra probeta medidora con tapón de 25 ml y combine los extractos etéreos. Lavar dos veces con 3 ml de solución ácida de cloruro de sodio (40 g/L), dejar reposar durante 15 minutos, usar un gotero para filtrar la capa de éter a través de sulfato de sodio anhidro en un matraz aforado de 25 ml, agregar éter hasta la marca y mezclar. . Transfiera con precisión 5 ml del extracto de éter dietílico a un tubo de ensayo graduado de 5 ml con tapón, colóquelo en un baño de agua a 40 °C para que se evapore hasta sequedad, agregue 2 ml de disolvente mixto de éter de petróleo y éter dietílico (3:1). para disolver el residuo y reservar. (2) Condiciones de referencia de cromatografía ① Columna cromatográfica: columna de vidrio con un diámetro interior de 3 mm y una longitud de 2 m, llena con ChromosoybWAW de malla 60-80 recubierta con 5% (fracción en masa) DEGS 1% (fracción en masa) H3 PO4 sólido líquido . ②Gas portador: El gas portador es nitrógeno y el caudal de gas es 50 ml/min (el nitrógeno, el aire y el hidrógeno son diferentes según el modelo de cada instrumento; seleccione las mejores condiciones de relación para cada uno). ③Temperatura: la temperatura de entrada de la muestra es de 230 °C, la temperatura del detector es de 230 °C y la temperatura de la columna es de 170 °C. (3) Determinación ① Inyecte 2 μL de la solución estándar de cada concentración en la serie estándar en el cromatógrafo de gases y mida las alturas de los picos de ácido sórbico y ácido benzoico en diferentes concentraciones. Dibuje una curva estándar con la concentración como abscisa y la altura del pico como ordenada. Los cromatogramas estándar de ácido sórbico y ácido benzoico se muestran en la Figura 8-1. El tiempo de retención del ácido sórbico es de 173 s y el del ácido benzoico es de 368 s. Figura 8-1 Cromatogramas estándar de ácido sórbico y ácido benzoico ② Inyecte 2 μL de solución de muestra, mida la altura del pico y luego compárelo con la curva estándar para la cuantificación. 2.3.4 En la fórmula de cálculo de los resultados: 1) El volumen del disolvente mezclado, ml: V2 - el volumen de la muestra inyectada durante la medición, μL - la masa de la muestra, g; de ácido benzoico por 1,18 para obtener el contenido de benzoato de sodio en la muestra. 3 Determinación del ácido peracético El ácido peracético, también llamado ácido peracético, es una solución acuosa mixta de peróxido de hidrógeno, ácido acético y trazas de ácido sulfúrico. El ácido peracético tiene un alto efecto letal sobre propágulos bacterianos, esporas, hongos y virus. Es un fungicida de amplio espectro, eficiente y de acción rápida. 3.1 Principio En condiciones ácidas, el peróxido de hidrógeno (H2O2) contenido en el ácido peracético se titula con una solución de titulación estándar de permanganato de potasio y luego el contenido de ácido peracético se determina mediante el método yodométrico indirecto. 3.2 Instrumentos y reactivos 3.2.1 Instrumentos ① Frasco de yodo de 250 ml. ②Bureta marrón de 50 ml. ③Balance analítico. 3.2.2 Reactivos ① Solución de ácido sulfúrico (1 9): Mida 1 ml de ácido sulfúrico y mezcle con 9 ml de agua. ② Solución de yoduro de potasio (100 g/L). ③Solución de sulfato de manganeso (100 g/L). ④Solución de molibdato de amonio (30 g/L). ⑤Solución estándar de permanganato de potasio [c(1/5KMnO4)=0,1mol/L]. ⑥Solución de valoración estándar de tiosulfato de sodio [c(Na2S2O3)-0,1 mol/L]. ⑦Líquido indicador de almidón (10g/L). 3.3 Pasos de la operación: Pese aproximadamente 0,5 g de la muestra (o pese aproximadamente 0,07 g de la muestra que contiene ácido peracético), con una precisión de 0,0001 gy colóquela en un recipiente precargado con 50 ml de agua, 5 ml de solución de ácido sulfúrico y Se ponen 3 gotas de solución de sulfato de manganeso en un matraz de yodo enfriado a 4°C, se agita bien y se titula con solución estándar de permanganato de potasio hasta que la solución adquiera un color rosa claro estable.

Luego agregue 10 ml de solución de yoduro de potasio y 3 gotas de solución de molibdato de amonio, agite suavemente, déjelo en un lugar oscuro durante 5 a 10 minutos y valore con la solución de titulación estándar de tiosulfato de sodio cuando esté cerca del punto final (la solución). es amarillo claro), agregue 1 ml de solución indicadora de almidón, continúe la titulación hasta que desaparezca el color azul y manténgalo sin cambios durante 30 segundos como punto final. Registre el volumen de solución de titulación estándar de tiosulfato de sodio consumido. 3.4 En la fórmula de cálculo de los resultados: La masa de la muestra, g; M: la masa molar de ácido peracético (M=0,03803 g/mol) equivalente a 1,00 ml de solución de titulación estándar de tiosulfato de sodio (c=1,000 mol/L). ; tomar los resultados de 2 mediciones paralelas La media aritmética es el resultado de la medición, y la diferencia entre los dos resultados de la medición paralela no deberá ser mayor que 0,3. 4 Determinación de parabenos: parahidroxibenzoato de etilo, parahidroxibenzoato de propilo y parahidroxibenzoato de butilo, y denominado etilparabeno, propilparabeno y butilparabeno. Los tres son derivados del ácido benzoico. las "Normas de higiene para el uso de aditivos alimentarios" de mi país (GB2760-1996) estipulan que la cantidad máxima de uso (calculada como ácido parahidroxibenzoico) de etil, propil y butil parabenos cuando se utilizan para conservar frutas y verduras es de 0,012 g/kg de vinagre; 0,10 g/kg; bebidas carbonatadas, pasteles, rellenos de yema de huevo, 0,20 g/kg; bebidas de frutas, mermeladas (excluidas las latas), salsa de soja, etc., 0,25 g/kg; 4.1 Cromatografía líquida de alta resolución 4.1.1 Principio: Los parabenos de la muestra se extraen con acetonitrilo, se filtran y luego se miden mediante cromatografía líquida de alta resolución, se compara con el estándar, se utiliza el tiempo de retención para identificar y la altura del pico para cuantificar. 4.1.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumentos ① Triturador de tejidos. ②Centrifugar. ③Cromatógrafo líquido de alto rendimiento (con detector UV). (2) Reactivos ① Acetonitrilo. Destilación en vaso completo. ② Solución estándar de parabenos: Pesar 50 mg de los parabenos correspondientes, disolverlos en un matraz aforado de 100 ml, diluir a volumen con acetonitrilo y mezclar. Pipetee 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 y 5,0 ml de las soluciones anteriores respectivamente, colóquelas en matraces volumétricos de 100 ml y diluya hasta la marca con acetonitrilo. Cada mililitro de esta serie de soluciones estándar contiene 5,0, 10,0, 15,0, 20,0 y 25,0 μg de parabenos respectivamente. 4.1.3 Pasos de la operación (1) Extracción de muestra: Pesar unos 20 g de muestra y triturarla. Pese con precisión 2 g de muestra en un tubo de centrífuga de 10 ml con tapón, agregue 5,0 ml de acetonitrilo y tape el tubo. Después de agitar durante 30 segundos, centrifugar a 500 r/min durante 5 minutos, transferir el sobrenadante a un matraz aforado de 25,0 ml, repetir la operación tres veces y diluir hasta la marca con acetonitrilo. Filtro con membrana filtrante de 0,45μm para medición cromatográfica. (2) Condiciones de referencia para análisis de cromatografía líquida de alta resolución ①Columna: μBondapak C18 30 cm × 4,6 mm. ②Flujo: 1,4 ml/min. ③Longitud de onda de detección: 254 nm. (3) Mida e inyecte 10 μL de la solución estándar de cada concentración en la serie estándar de parabenos y dibuje una curva estándar con la concentración en abscisas y la altura del pico en ordenadas. Al mismo tiempo, se inyectaron 10 μL de solución de muestra y se compararon cualitativa y cuantitativamente con la curva estándar. Los tiempos de retención de metilparabeno y propilparabeno son aproximadamente 4,2 min y 7,6 min respectivamente, y sus cromatogramas estándar se muestran en la Figura 8-2. 4.1.4 En la fórmula de cálculo de los resultados: , g; 25—volumen de la solución de muestra, ml.

4.2 Cromatografía de gases 4.2.1 Principio Después de acidificar la muestra, los parabenos se extraen y se concentran con éter, luego se separan y se miden utilizando un cromatógrafo de gases equipado con un detector de ionización de llama de hidrógeno y se comparan cuantitativamente con la serie estándar. 4.2.2 Instrumentos y reactivos (1) Instrumentos ①Concentrador K-D. ② Cromatógrafo de gases: equipado con detector de ionización de llama de hidrógeno. (2) Reactivos ① Éter dietílico redestilado. ②Etanol absoluto. ③Sulfato de sodio anhidro. ④ Solución saturada de cloruro de sodio. ⑤Solución de bicarbonato de sodio (1g/100ml). ⑥ Ácido clorhídrico (1 1): Medir 50 ml de ácido clorhídrico y diluir a 100 ml con agua. ⑦ Solución estándar de parahidroxibenzoato de etilo y parahidroxibenzoato de propilo: Pesar con precisión 0,050 g de parahidroxibenzoato de etilo y de parahidroxibenzoato de propilo, disolverlos en un matraz volumétrico de 50 ml y diluir hasta la marca con etanol absoluto. La solución equivale a cada mililitro en 1 mg de etilo. parahidroxibenzoato, éster propílico. ⑧Utilice una solución de parahidroxibenzoato de etilo y parahidroxibenzoato de propilo: tome una cantidad adecuada de una solución estándar de parahidroxibenzoato de etilo y parahidroxibenzoato de propilo y dilúyala con etanol absoluto al equivalente de 50, 100, 200, 400, 600, etc. por ml de 800 μg. parahidroxibenzoato de etilo y propilo. 4.2.3 Pasos de operación (1) Extracción y purificación de muestras. ①Salsa de soja, vinagre, zumo de frutas, etc.: Tomar 5g de la muestra prehomogeneizada en un embudo de decantación de 125ml, añadir 1ml de ácido clorhídrico (1 1) para acidificar, 10ml de solución saturada de cloruro de sodio, agitar bien y añadir 75 , 50, 50 ml de éter dietílico respectivamente. Extraer tres veces, 2 minutos cada vez, dejar reposar por un momento, desechar la capa de agua, combinar la capa de éter en un embudo de decantación de 250 ml, agregar 10 ml de solución saturada de cloruro de sodio, lavar una vez y. luego lavar con solución de bicarbonato de sodio (1g/100ml) 30, 30, 30ml y lavar 3 veces, desechando la capa de agua. Utilice papel de filtro para absorber el agua del cuello del embudo, tápelo con algodón absorbente, agregue 10 g de sulfato de sodio anhidro y déjelo a temperatura ambiente durante 30 minutos. Concéntrese hasta casi sequedad en un concentrador K-D y elimine el disolvente residual. con soplado de nitrógeno. Diluir a volumen con etanol absoluto para contener 1 mg de parahidroxibenzoato de etilo y propilo por ml para cromatografía de gases. ② Mermelada: Pesar 5 g de la muestra prehomogeneizada en un tubo de ensayo tapado de 100 ml, agregar 1 ml de ácido clorhídrico (1 1), 10 ml de solución saturada de cloruro de sodio, agitar bien y extraer 3 veces con 50, 30 y 30 ml de éter, 2 minutos cada vez, use una pipeta para transferir el éter a un embudo de decantación de 250 ml y proceda como se indica arriba. (2) Condiciones de referencia para el análisis por cromatografía de gases. ① Columna cromatográfica: diámetro interior 3 mm, longitud 2,6 m, recubierta internamente con 3SE-30/Chromoserb W AWI)-MCS, malla 60~80. ②Temperatura de detección: temperatura de la columna 170 ℃, temperatura de entrada y detector 220 ℃. ③Flujo de gas: nitrógeno, 40 ml/min; hidrógeno, 50 ml/min; aire, 500 ml/min. (3) Determinación: Inyecte 1 μL de cada concentración de líquido estándar en la serie estándar de parahidroxibenzoato de etilo y parabeno de propilo en el cromatógrafo de gases y mida las alturas de los picos de diferentes concentraciones de parahidroxibenzoato de etilo y parahidroxibenzoato de propilo. Dibuje una curva estándar con la concentración como abscisa y la altura del pico como ordenada. Al mismo tiempo, se inyectó 1 μL de solución de muestra, se midió la altura del pico y se comparó con la curva estándar para la cuantificación. 4.2.4 En la fórmula de cálculo de los resultados: V2: volumen de inyección de muestra, μL: masa de muestra, g.