¿Cuáles son los pasos experimentales de la citometría de flujo?

Experimento de citometría de flujo:

1. Preparar la suspensión celular y contar

2. Alicuota en 1 tubo por EP (1,5 ml) -2*10 6 células. alícuota, centrifugar a 3500 rpm, 4 grados.

3. Resuspender en 100ul de PBS, añadir 10ul de suero de rata para bloquear y proteger de la luz a 4 grados durante 30 minutos.

4. Añadir el correspondiente anticuerpo marcado con fluorescencia, mezclar bien, proteger de la luz e incubar a 4 grados durante 30 minutos.

5. Añadir 1ml de PBS y lavar dos veces.

6. Resuspender en 200ul de PBS, filtrar a través de una gasa y transferir al tubo de flujo para la detección del nivel superior.

Se pueden detectar células o partículas de tamaño similar.

Las muestras se transportan a través del fluido de la vaina y pasan por el rayo láser en una única cola. La muestra se puede etiquetar fluorescentemente con antelación según las necesidades de detección. Al pasar por el rayo láser, se obtendrá y registrará la señal fluorescente. Se pueden etiquetar diferentes marcadores fluorescentes al mismo tiempo para diferentes inspecciones. La ventaja es que se puede detectar una gran cantidad de muestras (de miles a decenas de miles de células por segundo) en poco tiempo.

Utilizado principalmente en diversas investigaciones biomédicas y diagnóstico clínico. Los estándares de diagnóstico internacionalmente aceptados para leucocitos y linfomas se determinan mediante citometría de flujo.

Referencia del contenido anterior: Enciclopedia Baidu-Citometría de flujo