¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la enfermedad del virus del mosaico de la colza?
Estado de clasificación: El virus del mosaico del tabaco pertenece al virus del mosaico del tabaco, una familia no especificada.
Purificación de virus: congelar hojas frescas enfermas a -65438±05°C durante la noche, exprimir el jugo, remojar el residuo con hidrogenofosfato dipotásico 2-3 veces, combinar el filtrado y mantenerlo a 30-50° C durante 20 minutos, luego agregar 0,2- Agitar 0,5 n-butanol durante 65438 ± 00 min, centrifugar a 2800 r/min, eliminar el precipitado durante 30 min y agregar 25 % al sobrenadante. Centrifugar durante 30 minutos, suspender el precipitado en tampón fosfato 0,02 mol/l (pH 7,2), luego añadir 0,2 mol/l pH 4,5 de tampón acetato de sodio para ajustar la acidez a pH 6 y centrifugar a 5000 r/min 65438 ± 00 min. Repita la precipitación y centrifugación con ácido acético varias veces y finalmente disuelva el precipitado con una pequeña cantidad de agua, dialice con agua destilada y centrifugue para eliminar una pequeña cantidad de proteína del huésped para obtener una preparación de virus. Muestra una curva típica de nucleoproteínas. Sólo hubo un pico en la electroforesis de la preparación purificada de este aislado. Pero si se mezcla con TMV para electroforesis, aparecerán dos picos.
Características físicas y químicas de los virus:
① Partículas de virus: observadas al microscopio electrónico, son virus en forma de bastón con una longitud de 300 nm*18 nm. El eje al eje corto es de aproximadamente 23, lo cual es fácil de detectar. Reúnalos en haces y colóquelos en husos. Coeficiente de sedimentación: 192S. A260/A280 es 1,09, el punto isoeléctrico es pH5,35. Peso molecular: 38*106u.
② Ácido nucleico: ARN del virus, con un contenido de 5,12 y un contenido de fósforo de 8,8. A260/A280 es 0,48, g:a:c:u = 23,2:28,0:19,9:29,0.
③Proteínas: El contenido total de nitrógeno de las proteínas es de 16,4. En 67 cloroetanol, la proteína se descompone en subunidades con un peso molecular de 65,438 05,000 ~ 65,438 07,000 U. Cada subunidad está compuesta por una cadena peptídica con treonina como C-terminal, y no hay ningún grupo amino α libre que forme un hueco. cáscara en forma de varilla con un diámetro de 40 A. Su composición de aminoácidos es Lys21, Asp14, Tyr710, Ser12, Glu20, Pro8, Giy3, Ala19, Vla10, Mel3, Ileu6, Leu 65438. Los primeros cinco aminoácidos del virus del mosaico de la colza se determinaron mediante el método del ganado. Los resultados mostraron que la serina, glicina, prolina, alanina y treonina eran las mismas que el extremo C de la cepa TMV.
Otros: el virus del mosaico de la colza y la cepa común de TMV (TMVc) tienen rangos de hospedadores, reacciones cruzadas y resistencia in vitro similares. Tienen el mismo modo de infección y son miembros del mismo género de TMV. . La interferencia del virus del mosaico de la colza con el TMV en el tabaco es muy débil. Cuando los dos virus se inocularon al mismo tiempo, el virus del mosaico de la colza dominó 2 o 3 días después de la inoculación, y luego la concentración de TMV superó gradualmente a la del virus del mosaico de la colza. El punto isoeléctrico del virus del mosaico de la colza es pH5,35, que es superior al TMV (pH3,7), y su coeficiente de sedimentación (192S) es superior al TMV (188S). El coeficiente de extinción de 27,2 es inferior al de TMV (29,1) y el peso molecular de la subunidad proteica de la cápside (15000u) es inferior al de TMV. La concentración óptima de ARN del virus del mosaico de la colza en el sistema libre de células de embrión de trigo es de 270 ng/ml, y la concentración óptima de TMV es de 160 ng/ml. El TMV-RNA de longitud completa no puede dirigir la síntesis de su proteína de la cápside en sistemas in vitro. Sin embargo, el BMV-RNA de longitud completa puede traducir la proteína de la cápside. En el sistema del germen de trigo, el principal producto de la síntesis de ARN del virus del mosaico de la colza es la proteína de la cápside (16,5 K), seguida de las proteínas de 36 K, 25 K y 19 K, mientras que el ARN de TMV sintetiza proteínas moleculares de 35 K, 30 K, 22 K y 17 K. La hibridación de ADN homólogo y heterólogo mostró que YMV está lejos de las cepas comunes de TMV, cepas de tomate y cepas de Rehmannia glutinosa. Además, la composición de aminoácidos del virus del mosaico de la colza es muy diferente de la del TMVc.
TMVc tiene 158 aminoácidos, mientras que YMV tiene sólo 149 aminoácidos y el contenido de la mayoría de los aminoácidos también es diferente. El virus del mosaico de la colza contiene histidina y metionina, que es diferente del TMVc e igual que el virus del mosaico de Plantago. Sin embargo, los últimos cinco aminoácidos de su hexapéptido C-terminal son los mismos que el TMVc y diferentes del virus del mosaico de Plantago. El extremo N del fragmento degradado por enzimas tiene solo 10 residuos del virus del mosaico de la colza, no contiene treonina ni glicina y contiene alanina. TMVc tiene 11 residuos en el extremo N, que contienen treonina y glicina, pero no alanina, lo que también es diferente. En resumen, se cree que el virus del mosaico de la colza es miembro del virus del mosaico del tabaco.