Reciclaje de consumibles de reactivos genéticos
Primero, ¿puedo mostrarte la guía? ¿SV? ¿gel? Entonces qué. ¿PCR? ¿Limpiar? La relación entre la eficiencia de recuperación del sistema y el tamaño del ADN (como se muestra a continuación). La purificación de esta empresa es definitivamente mejor que la de Tiangen, pero cuando se recuperan fragmentos de ADN de 23.000 pb, la eficiencia de recuperación es solo del 47%. ¿Se debe esto a que los fragmentos de ADN recuperados son demasiado grandes, incluso con la adición de agua o TE? Una vez disuelto el tampón, la columna de purificación no se puede filtrar, lo que provoca que se pierda algo de ADN. Y si recupera fragmentos de ADN del gel de agarosa, la tasa de recuperación disminuirá casi un 50%, razón por la cual el efecto de recuperación de ADN no es ideal.
No entiendo muy bien qué significa “los fragmentos son más pequeños que antes del reciclaje”. ¿Los productos de PCR se purifican directamente sin purificación en gel? La purificación directa no tiene sentido para la purificación de múltiples fragmentos grandes de ADN. Por lo tanto, primero debe realizar una electroforesis en gel en todos sus productos de PCR y luego cortar los fragmentos de ADN objetivo para la purificación y recuperación del gel.
A juzgar por los resultados experimentales, se estima que el kit que utilizó no puede filtrar moléculas de ADN de 23.000 pb, sino que solo puede filtrar fragmentos de impurezas más pequeños. Esta es también la razón por la que el gen objetivo se vuelve más pequeño después. purificación (de hecho estás reciclando impurezas). Se recomienda que se comunique con Tiangen Company para ver si tienen otros kits para fragmentos grandes de ADN (estoy en el extranjero, así que realmente no conozco las variedades de reactivos nacionales, lo siento), y luego asegúrese de realizar la recuperación en gel en lugar de hacerlo directamente. ¡Purifica el producto de PCR!