En el proceso de preparación de muestras de células de médula ósea de ratón teñidas, ¿cuáles son los pasos principales que afectan los resultados de la preparación?
En el proceso de preparación de muestras de cromosomas de células de médula ósea de ratón, debe prestar atención a los siguientes pasos:
Inyecte colchicina con 3 o 4 horas de antelación. El tiempo afectará a los cromosomas. Número y morfología de los cromosomas intermedios.
En el proceso de hipotonicidad, el tiempo y el soplado de aire son importantes. La hipotonicidad excesiva provocará un agrandamiento cromosómico y una hipertrofia de tinción. Si la hipotonicidad dura mucho tiempo, el color de los cromosomas teñidos será muy oscuro. y no se verán bandas.
Al gotear, si se trata de un experimento de enseñanza, se requiere que el portaobjetos esté sobre hielo e inclinado. La altura del goteo es generalmente de 25 a 30 cm. El goteo debe pasar a través de una lámpara de alcohol para evaporar el líquido. fijador. La cantidad de gotas no debe ser demasiada, de lo contrario se superpondrán. Si se trata de preparación de cromosomas, hay un titulador especial en el hospital.
Preparación de muestras de cromosomas de células de médula ósea de ratón:
Principio:
Debido a que las células de la médula ósea de las extremidades del ratón producen varias células sanguíneas y células primitivas. Tiene un alto grado de capacidad de división. Este experimento utiliza este material mediante pretratamiento, hipotonicidad, fijación, formación de películas, teñido, etc. Con las muestras de cromosomas se pueden observar muchos cromosomas en metafase y se pueden realizar análisis de cariotipo;
Reactivos y kits: colchicina, tinción de Zimmer, fijador, solución hipotónica, agua salada fisiológica;
Instrumentos y consumibles: balanza, centrífuga, incubadora a temperatura constante, microscopio;
Pasos experimentales
1. Materiales y métodos
1. Materiales: ratones.
2. Equipo: balanza, centrífuga, incubadora a temperatura constante, microscopio.
3. Fármacos: colchicina, tinción de Kinson, fijador, solución hipotónica y suero fisiológico.
II.Pasos
Tratamiento con colchicina--tomar médula ósea--tratamiento hipotónico--fijación--centrifugación--re-fijación--re-centrifugación--titulación--tinción --Examen microscópico--Sellado del portaobjetos.