Experimento de hidrólisis de sustancias macromoleculares biológicas de sustancias macromoleculares

Principio del método experimental: El proceso de hidrólisis se puede comprobar mediante cambios en el sustrato. Por ejemplo, el área donde las bacterias hidrolizan el almidón ya no produce color azul cuando se mide con yodo al hidrolizar gelatina; Obsérvese que la gelatina se licua después de la hidrólisis de la grasa. La producción de ácidos grasos cambia el pH del medio, y el indicador rojo neutro que contiene hace que el medio cambie de rojo claro a rojo oscuro.

Materiales experimentales: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa

Reactivos y kits: Medio aceite, medio almidón, medio gelatina, solución de yodo de Lugol

Instrumentos y consumibles: aguja y asa de inoculación en placa estéril

Pasos experimentales:

1. Prueba de hidrólisis de aceite

(1) Disolver cuando el cultivo de aceite Se enfría el medio a unos 45 °C, agítelo bien para que el aceite se distribuya uniformemente. Viértalo en un plato plano de forma estéril y espere a que se condense.

(2) Divida la placa preparada en dos mitades con un marcador, inocule una mitad con Staphylococcus aureus como control y la otra mitad con Bacillus subtilis como bacteria de prueba, y marque "+" con material estéril. operación.

(3) Colocar la placa inoculada boca abajo y cultivarla en invernadero a 37°C durante 24 horas.

(4) Saca el plato y observa el lugar donde crecen las bacterias en el fondo del plato. Si aparecen manchas rojas, significa que la grasa se ha hidrolizado, lo cual es una reacción positiva.

2. Prueba de hidrólisis del almidón

(1) Después de derretir el medio de cultivo de almidón, enfríelo a aproximadamente 45 ℃ y forme una placa plana mediante operación aséptica.

(2) Dividir la placa en dos mitades con un marcador, inocular una mitad con Escherichia coli como bacteria de prueba y la otra mitad con Bacillus subtilis como bacteria de control, e inocularlas con estrías asépticas.

(3) Coloque la placa inoculada arriba boca abajo y cultívela en un invernadero a 37°C durante 24 horas.

(4) Retire la placa que ha sido incubada durante 24 horas, abra la tapa de la placa, deje caer una pequeña cantidad de solución de yodo de Lugol en la placa y gire suavemente la placa para que el yodo La solución cubre uniformemente toda la placa. Si aparece un anillo incoloro y transparente alrededor del césped bacteriano, significa que el almidón ha sido hidrolizado. El tamaño del círculo transparente indica la capacidad de las bacterias para hidrolizar el almidón.

3. Prueba de licuefacción de gelatina

(1) Tomar tres tubos de medio de cultivo de gelatina y marcar con un marcador el nombre de las bacterias inoculadas en cada tubo. Se inocularon Escherichia coli, Bacillus subtilis y Pseudomonas aeruginosa con una aguja de inoculación mediante operación estéril.

(2) Después de la inoculación, colocar en invernadero a 20°C durante 2 a 5 días.

(3) Observar la licuefacción del medio de cultivo de gelatina.

4. Resumen de la lista