¿Qué instalaciones se requieren en la sala de amortiguación de un laboratorio de amplificación genética?

1. Estructura principal:

Actualmente, las placas de acero de color y los perfiles de aleación de aluminio del cuerpo principal del laboratorio se utilizan para las esquinas internas internas y externas de aleación de aluminio R50. el aluminio se utiliza para resolver el problema de la fácil contaminación y acumulación de polvo, fácil limpieza y otros problemas, y la estructura de placa de acero de color es sólida, las líneas son concisas y hermosas y el sellado es bueno

2. Ajuste estándar de la presión del aire en cuatro zonas:

Preparación de reactivos del proceso de PCR, preparación de muestras, área de amplificación de PCR. Y el área de detección y análisis de productos tiene cuatro áreas experimentales independientes y un corredor de amortiguación general en toda el área. El área experimental independiente está equipada con una zona de amortiguamiento y un ajuste de la presión de ventilación en cada área para proteger todo el proceso del experimento de PCR, las muestras de reactivos de la contaminación por aerosoles y reducir la contaminación ambiental de los productos de amplificación.

Desinfección:

Se instalan lámparas ultravioleta en la parte superior de las cuatro áreas de amortiguación y dentro de la ventana de transferencia de las cuatro áreas experimentales para desinfección

Se instala una mesa experimental con lámpara ultravioleta móvil en el área de preparación de reactivos y preparación de muestras. Lleve a cabo una desinfección local

4. Ventana de transferencia de cadena mecánica de acero inoxidable:

Las muestras de reactivo se transfieren a través de la ventana de transferencia de cadena mecánica de acero inoxidable (se recomienda el tipo de cadena eléctrica). asegúrese de que las muestras de reactivo no se contaminen durante el proceso de transferencia (Logística)

5.Se recomienda utilizar material enrollado de PVC o superficie autonivelante. conveniente para la limpieza y la resistencia a la corrosión. Si las condiciones no son adecuadas, utilice superficies de terrazo o baldosas de cerámica (al menos 800 mm × 800 mm). Las juntas deben ser inferiores a 2 mm.

6. Las lámparas deben estar purificadas para facilitar la limpieza y la acumulación de polvo.

Además: Laboratorio de PCR dos Área de trabajo funcional: Área de amplificación de ácidos nucleicos. El área de preamplificación incluye la sala de preparación de reactivos. Las salas de esta sala de preparación son independientes y pueden comunicarse entre sí. La presión del aire externo en las dos salas está en un estado presurizado. El área de amplificación de ácido nucleico incluye los productos del área de amplificación. El área de análisis utiliza un instrumento de PCR de fluorescencia real. y un analizador de carga viral de VIH. Las dos áreas del laboratorio de PCR se fusionan en una sola sala. Las dos salas y las dos salas deben ser independientes entre sí. Deben poder comunicarse entre sí de forma independiente. El área de amplificación es negativa. El laboratorio de PCR depende de las funciones de los instrumentos utilizados. Configure de manera razonable cada área de trabajo para utilizar la reacción ligada a la polimerasa: configure cuatro áreas de trabajo separadas: área de preparación de almacenamiento de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y. área de análisis del producto de amplificación si es necesario triturar el producto, se debe agregar un área de trituración del producto adicional si PCR de fluorescencia real: el área de amplificación de base y el área de análisis del producto base se combinan en la sala utilizando un analizador de PCR totalmente automatizado. el procesamiento de muestras, la extracción de ácidos nucleicos y la detección de amplificación, el área de preparación de muestras, el área de amplificación y el área de análisis de productos de amplificación se combinan en un área. En principio, el laboratorio de PCR debe establecerse en cinco o cuatro áreas o tres o dos trabajos separados. Áreas de preamplificación de amplificación de ácidos nucleicos. El área de amplificación de ácidos nucleicos debe cumplir con los siguientes requisitos previos:

Laboratorio de área previa de amplificación de ácidos nucleicos. Hay dos áreas experimentales en la misma posición, configuración de reactivos. , mesa de trabajo ultralimpia y funcionamiento en una cabina de seguridad para la manipulación de materiales

El área de amplificación de ácidos nucleicos utiliza un sistema de detección de amplificación completamente cerrado, un instrumento de PCR de fluorescencia real, etc.

Cada experimentador utiliza sus propios reactivos, consumibles y pipetas para contener contaminantes

Previo al experimento, el área operativa cuenta con utensilios compartidos para limpieza y desinfección

Reactivos y utensilios en cada área. Los instrumentos y equipos están dedicados para uso cruzado en esta área

3. Requisitos de flujo de aire y diferencia de presión

La dirección del flujo de aire en el laboratorio de PCR debe seguir estrictamente el área de preparación de almacenamiento de reactivos. → área de preparación de muestras → área de amplificación → La presión del aire en el área de análisis del producto de amplificación disminuye gradualmente para evitar que el producto de amplificación ingrese al área de preamplificación a lo largo del flujo de aire y la velocidad y dirección del viento son caóticas

Para garantizar la diferencia de presión en la habitación y evitar la contaminación, el ventilador de suministro de aire y el ventilador de extracción deben estar escritos claramente en el panel del aire acondicionado. La secuencia de apertura y la secuencia de cierre son caóticas primero.

La diferencia de presión estática. entre el nivel de limpieza del aire y la habitación adyacente debe ser inferior a 5 Pa. La diferencia de presión estática entre la sala (área) limpia y el aire exterior debe ser inferior a 10 Pa. Debe estar equipado para monitorear la diferencia de presión estática Equipo. y monitoreo regular

En general, la sala de preparación de reactivos y la sala de procesamiento de productos deben tener una ligera presión para evitar que el aire exterior que contiene aerosoles de ácido nucleico entre y cause contaminación; el volumen de aire de entrada debe controlarse para alcanzar la presión; efecto del volumen de aire de escape

La sala de amplificación de ácidos nucleicos y la sala de análisis de productos deben tener una ligera presión negativa para evitar que la difusión de aerosoles que contienen ácidos nucleicos contaminen los reactivos y el control del producto para controlar el escape. Volumen de aire y volumen de aire de entrada para lograr un efecto de presión negativa.

PCR ideal La presión se establece en la sala intermedia del laboratorio para que el aire interior fluya hacia el exterior y el aire exterior fluya hacia el laboratorio de PCR interior. La entrada de aire está controlada por el aire acondicionado central original.

Las salidas de aire acondicionado central se instalan en puntos designados

IV. Área de laboratorio y espacio entre equipos

En general, no existen requisitos estrictos para el área de cada habitación. poder colocar los instrumentos y equipos necesarios y ser conveniente para la operación y la seguridad del operador. El área de la sala del gabinete no puede ser más de 10 metros cuadrados, y la sala debe aumentarse en 10 metros cuadrados por cada gabinete de seguridad adicional. .

El área de la sala intermedia de cada laboratorio es generalmente de 1300* (1300 o 1500) mm, y el área de la sala intermedia no puede ser mayor que el área de la sala del laboratorio 1/8

Al hacer diseño gráfico, primero se debe considerar la seguridad del laboratorio, es propenso a explosiones, incendios, fugas de gases venenosos, etc. Al hacer diseño gráfico, debo tratar de mantener el laboratorio ventilado y las rutas de escape despejadas. De acuerdo con los estándares internacionales de ingeniería, he hecho la división como referencia:

El estándar para la división del banco experimental y el canal del banco experimental (el espacio entre canales está representado por L)

Lgt; operación de la estación lateral de 500 mm;

Lgt; 800 mm mientras está sentado y en funcionamiento;

Lgt; 1500 mm entre ambos lados del asiento;

Lgt; 1800 mm entre instrumentos sentados en ambos lados

La plataforma y la mesa de instrumentos deben estar demasiado cerca de la pared y a 400 mm de distancia de la pared. Es adecuado para el trabajo. Es peligroso y fácil de evacuar. Todos los pasillos entre los bancos de experimentación deben conducir al pasillo. Además: la altura del suelo del edificio del laboratorio debe ser de 3,7 metros-4,0 La altura libre del laboratorio debe ser. 2,7 a 2,8 metros Requisitos especiales como limpieza, gradiente de presión, temperatura y humedad constantes, etc. La altura libre del laboratorio debe ser de 2,5 a 2,7 metros (incluido el techo suspendido) el ancho libre del pasillo del laboratorio debe ser de 2,5 a 2,5 metros. 3,0 metros Normal La puerta doble del laboratorio debe tener entre 1,1 y 1,5 metros de ancho (llamada puerta) y la puerta simple debe tener entre 0,8 y 0,9 metros de ancho.

Requisitos de decoración limpia

En la sala (área) limpia, la superficie debe ser plana y lisa, con grietas, juntas apretadas, caída de partículas y capaz de resistir la limpieza y desinfección. La interfaz entre la pared y la superficie debe ser curva u otras medidas. se deben tomar medidas para reducir la acumulación de polvo y facilitar la limpieza

Diversos materiales en la sala (área) limpia En el diseño e instalación de tuberías, lámparas, salidas de aire e instalaciones públicas, se debe considerar evitar la fácil- piezas a limpiar

Se deben considerar las ventanas de la sala (área) limpia, los cobertizos y las piezas de conexión entre tuberías interiores, salidas de aire, lámparas y paredes o cobertizos. Requisitos de sellado

6. ropa de trabajo

Los trabajadores del taller de purificación deben usar ropa de trabajo que cumpla con los requisitos. El material, el estilo y el uso de la ropa de trabajo deben ser consistentes con los requisitos del nivel de limpieza del aire de la operación de producción y mixtos. con ropa de trabajo limpia debe ser suave, producir electricidad estática y desprender partículas fibrosas. La ropa de trabajo debe cubrir todo el cabello, la barba y los pies y puede bloquear el desprendimiento del cuerpo. Utilice ropa de trabajo con el mismo nivel de limpieza del aire. ropa de trabajo según sea necesario Desinfectar o esterilizar la ropa de trabajo según sea necesario. Se debe traer material particulado adicional para lavado y se deben establecer ciclos de limpieza para la ropa de trabajo.

El ingreso a cada área debe ser estrictamente individual. Utilizar la misma ropa de trabajo (por ejemplo, del mismo color) en la misma zona de trabajo. Los trabajadores deben dejar la ropa de trabajo con cinturones

El laboratorio debe establecer un sistema de gestión de procedimientos de limpieza e implementarlos razonablemente. Procedimientos de limpieza para el personal que ingresa al área limpia

7. Rutas de flujo y rutas logísticas

Los trabajadores que ingresan al área del laboratorio deben seguir la ruta:

Pública *** Área limpia - Vestuario (cambio de ropa limpia) - Sala de amortiguación - Área de experimentos contaminada

El camino para que el personal salga del laboratorio:

Área de prueba de contaminación - sala de amortiguación - ducha habitación (establecimiento de condiciones) - vestuario - área de limpieza pública

Todos los artículos que ingresan al área experimental deben estar bloqueados con puertas dobles. La ventana de transferencia debe desinfectarse antes de ingresar al laboratorio. Todos los artículos deben pasar a través de la ventana de transferencia. antes de ser trasladado al área pública limpia fuera del laboratorio

8. Dirección de apertura de la puerta

Edificio del laboratorio La altura del piso debe ser de 3,7 metros a 4,0 metros la altura libre del laboratorio de PCR. debe ser de 2,5 metros a 2,7 metros (incluido el techo suspendido); el ancho libre del pasillo del laboratorio debe ser de 2,5 metros a 3,0 metros. Las puertas dobles de los laboratorios ordinarios deben tener de 1,1 metros a 1,5 metros de ancho (llamadas puertas). y el ancho de una sola puerta es de 0,8 metros a 0,9 metros.

Por lo general, las puertas del laboratorio deben mirar principalmente hacia la sala peligrosa. La puerta debe mirar hacia afuera. El material de la puerta debe ser vidrio a presión.

Sala con gradiente de presión La dirección de apertura de la puerta debe ser hacia el lado de presión;

Teniendo en cuenta la seguridad contra incendios, la dirección de apertura de algunas puertas de escape principales debe ser hacia el área limpia

9 Consideración de equipamiento y equipamiento básico

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(1) Área de preparación y almacenamiento de reactivos

Esta área experimental se utiliza principalmente para almacenar reactivos, preparar reactivos, preparar reactivos y preparar las mezclas de reacción principales. Los materiales para la producción de productos deben transportarse directamente. a esta área a través de sus materias primas de reactivos regionales deben almacenarse en esta área y los reactivos de almacenamiento requeridos y la presión del flujo de aire deben controlarse en esta área. Esta área debe mantenerse a una ligera presión externa

La principal. El equipo en el área de preparación de reactivos debe ser sumadores, refrigeradores, planos y de baja velocidad. Utilice el banco de trabajo ultralimpio como superficie de operación de preparación de reactivos para retirar la máquina, mezclar el mezclador, mover la lámpara UV, etc.

(2) Área de preparación de muestras

Esta área se utiliza principalmente para el almacenamiento operativo del cuaderno y la preparación de ácido nucleico (ARN, ADN), extracción, almacenamiento y adición al tubo de reacción de amplificación para medir el ADN y la presión. Requisitos de gradiente del área local: en relación con la presión del área adyacente para evitar que la contaminación por aerosoles del área adyacente ingrese al área. Además, debido a la contaminación por aerosoles causada por la operación de adición, se debe evitar caminar en esta área. /p>

Los principales instrumentos y equipos en el área de preparación de muestras deben ser gabinetes de seguridad (B2). Para evitar la contaminación cruzada entre la circulación repetida y la preparación de muestras en el gabinete de extracción de ácidos nucleicos, los resultados falsos positivos deben estar equipados con un. dispensador, desacoplamiento de alta velocidad de escritorio (congelación y calentamiento), descontaminación de baja velocidad de escritorio, equipo de temperatura constante (baño de agua/o baño seco), refrigerador, mezclador, lámpara UV, etc.

(3) Área de análisis de productos de amplificación

Esta área se utiliza principalmente para la amplificación de ADN y la determinación de fragmentos de amplificación. La plantilla de ADN preparada (de esta área de preparación) se agrega a la mezcla de reacción principal (desde el área de preparación de almacenamiento de reactivos). preparar la mezcla de reacción. Esta área Requisitos de gradiente de presión en esta área: presión negativa en comparación con las áreas adyacentes para evitar fugas de aerosoles en esta área para evitar la contaminación causada por aerosoles Se deben realizar las operaciones de separación necesarias en esta área. en un banco limpio

El instrumento principal en el área de amplificación es el termociclador de amplificación de ácidos nucleicos (instrumento de PCR, fluorescencia real u ordinario. La fuente de alimentación del termociclador debe ser dedicada y equipada con un regulado). fuente de alimentación o UPS para evitar la influencia de la amplificación de la onda de voltaje en la medición. Además, un sumador, banco super Clean, etc.

Área de análisis de productos: Los instrumentos y equipos utilizados en esta área son sumadores de energía, electroforesis. aparato (tanque), aparato de electrotransferencia, horno de hibridación o caja de hibridación, baño maría, secuenciador de ADN y lector de microplacas, etc.