Métodos de detección de E. coli
1. Aislamiento e identificación de bacterias
1. Se toman muestras: para infecciones extraintestinales se toman muestras de orina, sangre, pus, líquido cefalorraquídeo, etc., y para las heces. diarrea.
2. Aislamiento, cultivo e identificación: Las muestras fecales se inoculan directamente en medio de cultivo selectivo de Enterobacteriaceae. La sangre debe enriquecerse primero con caldo y luego transferirse a placas de agar sangre. Se pueden inocular otras muestras simultáneamente con placas de agar sangre y medios selectivos para enterobacterias.
Después de la incubación a 37°C durante 18 a 24 horas, observar las colonias y teñir el frotis al microscopio. Para su identificación se utilizan una serie de reacciones bioquímicas. Primero se debe realizar una prueba de tipificación serológica de Escherichia coli enteropatógena. Pruebe la enteromicotoxina si es necesario.
Además de determinar E. coli en el sistema urinario, también se debe contar. Sólo cuando el contenido bacteriano por mililitro de orina es ≥100.000 puede tener valor diagnóstico.
2. Examen bacteriológico sanitario
E. coli se excreta constantemente con las heces, contaminando el ambiente circundante, fuentes de agua, alimentos, etc. Al tomar muestras para inspección, cuanto más E. coli haya en la muestra, más grave será la contaminación de la muestra con heces y también indica mayor posibilidad de que haya bacterias patógenas intestinales en la muestra. Por lo tanto, se deben realizar exámenes bacteriológicos higiénicos del agua potable, alimentos y bebidas.
1. Número total de bacterias: El número de bacterias contenidas en cada mililitro o por gramo de muestra se detecta y calcula mediante cultivo de vertido. El estándar de higiene de China es que el número total de bacterias en el agua potable no debe exceder las 100 por mililitro.
2. Índice de recuento de coliformes: se refiere al número de coliformes por litro, medido mediante el método de fermentación de la lactosa. Los estándares de salud de China son que no debe haber más de 3 coliformes por 1000 ml de agua potable; no más de 5 coliformes por 100 ml de refrescos, jugos, etc. embotellados.
3. Detección del analizador microbiano cuantitativo totalmente automático (TEMPO)
Existen dos métodos para contar y detectar coliformes en el analizador microbiano cuantitativo totalmente automático (TEMPO): TC y CC. TEMPOTC fue desarrollado para lograr niveles de rendimiento equivalentes al estándar NFISO4832.
El método TEMPOCC es un método utilizado específicamente para contar coliformes en alimentos en un plazo de 24 horas según el método BAM del instrumento TEMPO. Este método pretende lograr los mismos resultados que el método oficial 966.24 de la AOAC y los métodos de prueba de lácteos de la Federación Estadounidense de Salud Pública y Servicios Humanos (SMEDP). El sistema TEMPO estima la cantidad de grupos de E. coli en la muestra original en función del tamaño y la cantidad de huecos positivos.
Información ampliada:
El método de fermentación multitubos es un método tradicional para detectar E. coli en agua. Este método se realiza de forma continua en un medio que contiene sustratos fluorescentes a 44,5°C. Después de cultivar durante 24 horas, se puede producir glucuronidasa, que descompone el sustrato fluorescente, liberando así productos fluorescentes, provocando así que el medio de cultivo produzca una fluorescencia característica bajo irradiación de luz ultravioleta.
Este método se puede utilizar para estimar estadísticamente el número de colonias en la muestra original.
Generalmente, se realizan las siguientes pruebas: primero, fermentación, en un tubo de fermentación de lactosa y sales biliares de alimentación simple o doble, luego, una prueba de cultivo de separación, utilizando una placa de Petri de eosina azul de metileno para separar; y luego, en un tubo de fermentación de lactosa se realiza la fermentación secundaria, y finalmente se completa mediante tinción de esporas, tinción de Gram, observación microscópica, etc.
El método de fermentación de tubos múltiples no tiene altos requisitos para las condiciones de prueba y es de bajo costo. Sin embargo, el tiempo de detección es largo y otras condiciones interfieren fácilmente, lo que a su vez afecta la precisión de la prueba. los resultados de la medición.
Enciclopedia Baidu-E. coli