Tecnología de inmovilización para la síntesis de péptidos en fase sólida
La característica más importante que distingue la síntesis en fase sólida de otras técnicas es el soporte en fase sólida. Los soportes en fase sólida que pueden usarse para la síntesis de péptidos deben cumplir los siguientes requisitos: deben contener sitios reactivos (o grupos reactivos) para que las cadenas peptídicas puedan unirse a estos sitios y luego eliminarse deben ser sensibles a las condiciones durante la síntesis; proceso de síntesis. Las condiciones físicas y químicas son estables; deben permitir un contacto rápido y sin obstáculos de la cadena peptídica en crecimiento con los reactivos; además, el soporte debe permitir la provisión de suficientes puntos de unión para producir rendimientos de péptidos útiles por unidad de volumen del soporte, y debe ser lo más factible posible Reducir las interacciones entre las cadenas peptídicas unidas en el portador.
Existen tres tipos principales de portadores poliméricos utilizados para la síntesis de péptidos en fase sólida: resina reticulada de poliestireno-estireno, poliacrilamida, resina a base de polietilenglicol y sus derivados, que sólo pueden ser grupos reactivos. introducido para estar directamente unido al (primer) aminoácido. Estas resinas y sus derivados se pueden dividir en resinas de clorometilo, resinas de carboxilo, resinas de amino o resinas de hidrazida según los grupos reactivos introducidos. Las resinas de clorometilo se usan comúnmente en la síntesis de BOC, como las resinas Merrifield, mientras que las resinas carboxílicas se usan comúnmente en la síntesis de FMOC, como las resinas Wang. La inmovilización de aminoácidos se logra principalmente formando un enlace de valencia positivo entre el grupo carboxilo del aminoácido protegido y el grupo activo de la resina. Hay muchas formas de formar un enlace de valencia positivo: generalmente se utiliza resina de clorometilo en tetrametilamonio. o sales de sodio, potasio o cesio de aminoácidos protegidos y luego reaccionar directamente con la resina o en un disolvente orgánico apropiado (como dioxano, DMF o DMSO) a una temperatura adecuada. Para resina carboxílica, un agente de condensación apropiado como DCC o carboxidimidazol. generalmente se agrega para formar un éster entre el aminoácido protegido y la resina para completar la fijación del aminoácido; para la resina amino o la resina de hidrazida, se agrega un agente de condensación apropiado como DCC para completar la fijación de los aminoácidos. protegiendo los enlaces amida formados entre los aminoácidos y la resina.