¿Se puede volver a limpiar el fondo de la película WB si está sucio?
Lo que hay que dejar claro aquí es que el fondo sucio no es necesariamente causado por instrumentos sucios. También puede ser causado por la degradación de proteínas o condiciones inapropiadas durante todo el experimento. Puede ser causado por los siguientes problemas. : ：
1. Preparación experimental
Se deben limpiar los instrumentos de molienda, placas de vidrio para hacer gel, peines, etc., necesarios para la extracción de proteínas.
Si el equipo no se utiliza durante un tiempo prolongado, se recomienda volver a limpiarlo antes del experimento para evitar la correspondiente contaminación.
2. Extracción de proteínas
Elija una solución de lisis de proteínas adecuada para eliminar por completo algunos factores que interfieren, como ácidos nucleicos, polisacáridos, lípidos, etc.
Se recomienda que tras medir la concentración, la proteína se desnaturalice y se almacene en alícuotas para evitar repetidas heladas y descongelaciones de la proteína en conejos, que pueden provocar su degradación.
3. Llenado de pegamento
Los reactivos deben mezclarse uniformemente antes del llenado de pegamento. Durante el proceso de llenado de pegamento, se debe controlar la velocidad y agregar lentamente para evitar la generación de burbujas.
Después de llenar el gel de separación, agregue lentamente el sellador de alcohol Z anhidro. Los pasos de operación deben ser lentos para evitar que la superficie de goma se lave y se deforme. Mientras espera que el gel de separación se solidifique. Agite siempre y observe.
Si la temperatura es alta se solidificará en unos 30 minutos. En invierno, cuando la temperatura es baja, el tiempo de solidificación puede ser mayor.
Si la superficie líquida del gel de separación es desigual, afectará los resultados de la electroforesis de proteínas posterior.
4. Transferencia
Antes de la transferencia, debe colocar 3-4 piezas de papel de filtro en ambos lados de la placa de transferencia (el mismo número en ambos lados).
No toques la membrana de PVDF y el papel de filtro directamente con las manos, el aceite de tus manos las contaminará. Asegúrate de usar guantes limpios y pinzas en la medida de lo posible durante todo el proceso.
Proceso de transferencia esponja papel filtro gel-membrana PVDF papel filtro esponja gas cada capa