La razón por la cual la eficiencia de amplificación QPCR es superior a 100

La dilución de la muestra no es razonable.

La longitud del amplicón qPCR se controla entre 70 y 300 pb. En las mismas condiciones, cuanto más pequeño sea el fragmento, mayor será la eficiencia de amplificación teórica. Si la longitud del amplicón es inferior a 70 pb, existe el riesgo de que el resultado se vea afectado por los dímeros del cebador.

Se necesitan varias calibraciones y mantenimiento, incluso los instrumentos sin calibración deben verificarse periódicamente. Utilice consumibles de baja adsorción, puntas de succión, filas de ocho filas, etc. al diluir muestras de concentración más baja. Moléculas de ADN debido a la interacción electrostática, se puede usar Tween de baja concentración para diluirlas.