Diseño de imprimación en línea primer3.0: cómo usar PrimerExpress3.0 en el sistema Windows 7

Diseño de cebador de PCR cuantitativo

Es absolutamente posible. La longitud de la PCR puede oscilar entre 50 pb y cientos, sin limitarse a 150-300 pares de bases. Lo que dijiste anteriormente tiene sentido, pero una cosa a tener en cuenta es que lo mejor es calcular el valor de Tm del fragmento amplificado. Al hacer la curva de fusión, no basta con tener un solo pico, y la TM obtenida debe ser consistente. con la Tm que calculaste OK.

Que esté en el área de traducción no tiene ningún efecto. Cómo utilizar PrimerExpress3.0 en el sistema Windows 7

PrimerExpress3.0 es un diseño de cebador y sonda desarrollado por ABI Company para PCR cuantitativa de fluorescencia. También es uno de los software de este tipo más utilizados. Sin embargo, PrimerExpress3.0 se puede usar normalmente en el sistema XP, pero habrá un problema de que no se puede usar en Windows 7. El siguiente método puede resolver este problema.

Después de instalar PrimerExpress 3.0 en una computadora con Win7, abra el software y haga clic en Nuevo. Encuentro que la ventana de entrada de secuencia no aparece y el software no se puede utilizar normalmente.

Cierre el software, haga clic derecho en "Propiedades" en el icono del escritorio, seleccione la columna "Compatibilidad", marque "Ejecutar este programa en modo de compatibilidad" en el modo de compatibilidad y seleccione "Windows 2000" en el siguiente modo ",Claro.

En este momento, abra el software nuevamente, haga clic en Nuevo, aparecerá el cuadro de entrada de secuencia y podrá continuar con el diseño posterior del cebador y la sonda. El microARN es inherentemente corto, cómo diseñar cebadores

¿Quieres pcrcDNA?

Generalmente, el cebador está diseñado para abarcar al menos una unión exón-exonión, es decir, el cebador está entre unión de dos exones, de modo que no habrá contaminación del ADN durante la PCR. Ahora NCBI puede diseñar cebadores directamente, también puede elegir el método de diseño anterior o puede encontrar la secuencia de ADNc y diseñarla usted mismo en primer3~

Proceso de diseño de cebadores:

1. Confirme el nombre de la secuencia amplificada requerida a través de la literatura existente.

2. Busque la secuencia completa del gen en Internet y archívela. Confirme el logotipo "ARNm" en la página de referencia de secuencia.

3. Copie la secuencia, péguela en el software online "Primer3" o "Primer5", establezca los parámetros, diseñe los cebadores y guárdelos.

4. Seleccione un par de las secuencias de cebadores proporcionadas y busque utilizando el software en línea "NCBIBLAST".

5. Pegue la secuencia completa y la secuencia del cebador en el software "PrimerPrimer" para comprobar la presencia de amplificación no específica, fragmentos complementarios y "estructuras en horquilla".

6. Enviar la secuencia del cebador a una empresa de confianza para su síntesis.