¿Cuáles son las dificultades para aprender PCR? Me gustaría escuchar experiencia personal.
1. Haga los preparativos antes del experimento: escriba claramente el sistema experimental, los pasos y las condiciones en su cuaderno, verifique si la plantilla y los cebadores son correctos y adecuados. prepare la caja de hielo y comience desde: descongele los reactivos sacados a 20 ℃ con anticipación, mezcle bien y colóquelos en la caja de hielo uno por uno.
2. varios tubos, mézclelos primero y luego cárguelos. Por ejemplo, si necesita tubos p20, mézclelos según 22 tubos y luego agregue diferentes cebadores o plantillas después del empaquetado. Los novatos tienden a perderse algo. Lo mejor es agregar reactivos, marcar las casillas en su cuaderno y elegir tubos de PCR de buena calidad.
3. Prevenir la contaminación: Antes del experimento, limpie la mesa o experimente sobre la mesa esterilizada. Si es posible, prepare un juego de pipetas específicas para PCR y manténgalas limpias. Las puntas de succión deben estar especialmente esterilizadas y el agua utilizada debe ser agua pura, esterilizada y envasada. No hables durante el experimento. Lo mejor es usar una máscara. También es necesario evitar la contaminación cruzada de los reactivos. Recuerde reemplazar la punta de la pipeta después de cada adición de reactivos. Si no está seguro de si se ha reemplazado, debe reemplazar el cabezal de la pistola. Si el reactivo está contaminado, en el peor de los casos reemplácelo. Si el cebador o la plantilla clave se contamina, podría ser desastroso.
4. Realizar controles negativos y positivos para facilitar el análisis de resultados.
Es puramente hecho a mano. Le invitamos a adoptarlo y continuar discutiéndolo. ¡Buena suerte con el experimento!