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Como sugieren los nombres, tanto el microscopio 4Pi como el I5M se basan en frentes de onda circulares de gran ángulo. El ángulo de media apertura más grande hasta la fecha es de 68 grados, que se obtuvo con una lente de inmersión corregida con precisión. Los cálculos de PSF muestran que por cada aumento de 6 grados en el ángulo entre dos disparos opuestos, el PSF de la hoja disminuye en 7 PSF de intensidad (Figura I). Tipo C*** El PSF efectivo proporcionado por el microscopio 4Pi enfocado de excitación de protón único es:
heffr=hexc
4Pi -hdet
4Pi=Eexcr M ? EexcM ? r2 - Edetr
M ? Entre ellos, Eexc y Edet son el plano focal de excitación y el plano focal de detección respectivamente, M es la matriz de transformación que controla la superficie de la onda circular y pr representa el orificio. función.