Separación y determinación de pigmentos vegetales carotenoides “Laboratorio

1. Principio

Utilice acetona y éter de petróleo para extraer carotenoides y otros pigmentos vegetales en los alimentos, y utilice éter de petróleo como agente revelador para realizar la cromatografía en papel. es el menos polar y se mueve más rápido, lo que permite separarlo de otros pigmentos. Luego, la banda que contiene carotenoides se corta y se mide cuantitativamente a una longitud de onda de 450 nm después de la elución.

2. Ámbito de aplicación

Con referencia a GB12389-90, este método es adecuado para la determinación de carotenoides en alimentos vegetales y alimentos mixtos que contienen alimentos vegetales. El límite mínimo de detección es. 0,11 µg.

3. Instrumentos y equipos

(1) Instrumentos de laboratorio de uso común.

(2) Columna de cromatografía de vidrio.

(3) Espectrofotómetro.

(4) Rotavapor: con botella esférica de 150 ml.

(5) Baño María a temperatura constante.

(6) Retorta de saponificación.

(7) Tomamuestras o microjeringa.

(8) Papel filtro.

4. Reactivos

A menos que se indique lo contrario, los reactivos experimentales son de grado analítico y el agua es agua destilada.

4.1 Éter de petróleo (rango de ebullición 30-60 ℃): También es un agente revelador.

4.2 Sulfato de sodio anhidro: grado analítico.

4.3 Solución de sulfato de sodio 5.

4.4 1 1 Solución de hidróxido de potasio: Disolver 50g de hidróxido de potasio en 50ml de agua.

4.5 Etanol absoluto: Se requiere desalinización.

(1) Compruebe si el etanol contiene aldehídos:

Solución de amoníaco de plata: agregue agua concentrada de amoníaco a la solución de nitrato de plata 5 hasta que el precipitado de óxido de plata se disuelva, luego agregue unas gotas de Solución de hidróxido de sodio de 2,5 mol/L; si se produce precipitación, agregue amoníaco concentrado para disolverla.

Reacción de espejo de plata: Añadir 2ml de solución de plata y amoniaco al tubo de ensayo, añadir unas gotas de etanol y agitar bien, añadir un poco de solución de hidróxido de sodio de 2,5mol/L y calentar. Si no hay aldehído en el etanol, no habrá precipitación de plata; de lo contrario, habrá una reacción de espejo de plata.

(2) Método de eliminación del dealdehído: disolver 2 g de nitrato de plata en una pequeña cantidad de agua, disolver 4 g de hidróxido de sodio en etanol tibio, verter ambos en 1 litro de etanol, agitar bien y dejar reposar uno a dos días después, verter el sobrenadante en una botella de destilación, destilar y desechar los 50 ml iniciales. (Nota: La velocidad de destilación se controla a 1 gota/segundo.)

4.6 Solución de almacenamiento del estándar de β-caroteno: Tome 5 mg de estándar de β-caroteno y disuélvalos en 10 ml de cloroformo, con una concentración de aproximadamente 500 μg /ml, exacto