¿Por qué necesitamos corregir la interferencia de la feofitina a en los experimentos?
La clorofila es el pigmento verde de las plantas, que puede producir energía mediante la fotosíntesis bajo la acción de la luz. Al medir la clorofila, se puede medir indirectamente la cantidad de plantas fotosintéticas (algas o fitoplancton) en una muestra.
El pigmento clorofila ?a? es adecuado para todas las especies de plantas, mientras que otras clorofilas (como ?b, c1, c2, d, f) sólo son adecuadas para algunas plantas, algas o cianobacterias específicas y pueden ser Se utiliza para indicar la presencia de algunas masas importantes de algas.
2. La necesidad de medir la clorofila a
El flujo de nutrientes (como fósforo y nitrógeno) hacia las masas de agua continentales o costeras hará que las algas crezcan de forma salvaje. La descomposición posterior reducirá el contenido de la muestra en el cuerpo de agua y afectará el entorno de vida de los peces, mariscos, crustáceos y otros organismos. Los cambios en la carga de nutrientes también pueden alterar la composición y diversidad de la población de fitoplancton.
Una concentración alta de algas indica un deterioro de la calidad del agua, mientras que una concentración baja indica una mejor calidad del agua. Los aumentos de fitoplancton pueden enturbiar el agua, afectando el crecimiento de las praderas marinas y las pesquerías asociadas. En algunos eventos extremos, la eutrofización puede causar anoxia, zonas anóxicas que pueden matar peces, mariscos y crustáceos, y provocar brotes de algas tóxicas y nocivas.
Desde la perspectiva de la calidad del agua, la clorofila a es el mejor y más directo método entre los métodos existentes, que puede medir la cantidad y calidad del fitoplancton y el daño potencial causado por la turbidez del agua y el bajo oxígeno disuelto.
La unidad de clorofila a es μg/L o mg/L. Generalmente se cree que cantidades superiores a 100 μg/L tendrán un impacto en los peces. Incluso el agua más limpia contendrá casi 5 μg/l de clorofila a. Existen normas específicas de calidad del agua para diferentes usos y objetivos de las masas de agua. Para ser precisos, la condición específica de la calidad del agua se puede juzgar mediante la detección de clorofila a.
3. Objetos de aplicación
Por ejemplo, una planta acuática con un depósito de agua superficial necesita medir la clorofila a para controlar las fuentes de agua. Esto a menudo implica predecir y controlar la proliferación de algas o identificar puntos de entrada de agua para evitar la intrusión de algas y evitar la obstrucción de los sistemas de filtración, el aumento de las cargas orgánicas, lo que causa daños a la salud pública y requiere procesos de tratamiento adicionales.
4. Instrucciones de medición
Filtrar una cantidad conocida de muestra de agua, normalmente a través de un filtro de fibra de vidrio. El filtro debe molerse en una solución de acetona y luego procesarse y analizarse.
Suele haber tres métodos estándar para medir la clorofila: espectrofotometría (espectrofotómetro UV), fluorescencia (espectrofotómetro de fluorescencia), cromatografía líquida de alta resolución (HPLC, por sus siglas en inglés) (instrumento de cromatografía líquida de alta resolución).
La espectrofotometría es el método más utilizado en los laboratorios. El procesamiento de muestras suele tardar entre 1 y 5 minutos. El límite inferior general de medición es 0,08 mg/L6 (utilizando una celda colorimétrica de 1 cm también). muy bajo. La HPLC puede distinguir los tipos de clorofila y pigmentos auxiliares, pero la medición requiere mucho tiempo y es técnicamente exigente. Por lo general, se necesitan entre 20 y 25 minutos para procesar la muestra. Por 1 HPLC, es posible que pueda comprar 10 espectrofotómetros muy buenos y el costo de los consumibles posteriores también es muy alto. El método de fluorescencia mide indirectamente la clorofila, que es más adecuada para el seguimiento remoto.
El espectrofotómetro utilizado requiere un ancho de banda espectral estrecho y múltiples longitudes de onda para medir. Por ejemplo, el método de tres colores utiliza 750 nm (corrección de turbidez), 664 nm (clorofila a), 647 nm (corrección de clorofila b) y 630 nm (corrección de clorofila c1, c2). Otro método alternativo es utilizar ?750, 664, 665 nm para medir antes y después de la acidificación, lo que puede corregir la interferencia de feofitina y turbidez. Elija la longitud de onda y la ecuación según el método elegido.