Cómo liberar la inhibición en reacciones de PCR

De acuerdo con el valor de Tm del cebador, establezca el gradiente de temperatura de recocido en el rango de 5 a 10 grados. ¡La mayoría de los instrumentos de PCR tienen esta característica!

La temperatura de cada pocillo de una fila (12 pocillos) o de una columna (8 pocillos) de la máquina de PCR es diferente. Pones la mezcla de PCR a reaccionar en el pocillo correspondiente (asegúrate de que la temperatura sea diferente). solución de reacción en cada pocillo (la misma), registre la temperatura correspondiente y use gel de agarosa o electroforesis en gel PAGE para detectar la concentración del producto objetivo en el producto de PCR, la presencia o ausencia de productos no objetivo, el brillo del banda diana, la presencia o ausencia de cebadores-dímeros y no específicos La presencia o ausencia de bandas amplificadas heterosexuales, etc. Seleccione la temperatura óptima como temperatura de recocido