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Cómo liberar la inhibición en reacciones de PCR

Cómo liberar la inhibición de la reacción de PCR

De acuerdo con el valor de Tm del cebador, establezca el gradiente de temperatura de recocido en el rango de 5 a 10 grados. ¡La mayoría de los instrumentos de PCR tienen esta característica!

La temperatura de cada pocillo de una fila (12 pocillos) o de una columna (8 pocillos) de la máquina de PCR es diferente. Pones la mezcla de PCR a reaccionar en el pocillo correspondiente (asegúrate de que la temperatura sea diferente). solución de reacción en cada pocillo (la misma), registre la temperatura correspondiente y use gel de agarosa o electroforesis en gel PAGE para detectar la concentración del producto objetivo en el producto de PCR, la presencia o ausencia de productos no objetivo, el brillo del banda diana, la presencia o ausencia de cebadores-dímeros y no específicos La presencia o ausencia de bandas amplificadas heterosexuales, etc. Seleccione la temperatura óptima como temperatura de recocido