Instrucciones de uso de la solución de disociación de tejidos
Instrucciones de uso de la solución de disociación de tejidos
Introducción del producto
La solución de disociación de tejidos es una mezcla compuesta por una variedad de enzimas biológicas, que pueden actuar de forma suave, rápida y eficientemente El tejido conectivo del tejido se descompone enzimáticamente y las células se liberan para formar una suspensión celular. La solución de disociación de tejidos es adecuada para la separación de células de diversos tejidos, como el bazo, el hígado, el riñón, el páncreas, el tejido de la mucosa gástrica y el tejido tumoral. Las células obtenidas de tejidos disociados son muy activas y pueden retener los antígenos de superficie y otras características de las células. Las células se pueden utilizar para cultivo celular, clasificación celular, detección de fármacos, secuenciación de células individuales, etc.
Condiciones de almacenamiento y período de validez
Almacenado a -20 ℃, el período de validez es de 6 meses.
Lista de empaque del producto
Nombre, especificaciones y cantidad
Solución de disociación de tejidos 10ml 1 frasco
Instrucciones/1 copia
Reactivos, consumibles, equipos e instrumentos necesarios
?Reactivos: medio de cultivo celular, solución de lisis de glóbulos rojos (opcional)
?Consumibles: tubos de centrífuga, filtros estériles desechables ( 70?m)
?Instrumentos: tijeras oftálmicas, pinzas oftálmicas
?Instrumentos: agitador de temperatura constante, centrífuga
Pasos de operación
1. Tome aproximadamente 100 mg de tejido fresco y agréguelos a un tubo de centrífuga estéril. Utilice tijeras oftálmicas para cortar completamente el tejido a 1-2 mm3 y agregue 1 ml de solución de digestión de tejido.
2. Coloque el tubo de centrífuga en un agitador de temperatura constante e incube con agitación a 37 °C y 180 rpm durante 10-30 minutos para digerir el tejido. El tiempo de digestión se puede acortar o ampliar adecuadamente según. diferentes tejidos.
3. Después de la incubación, filtrar el homogeneizado de tejido en el tubo de centrífuga con un filtro estéril de 70 µm, luego añadir medio de cultivo celular para enjuagar el filtro y recoger el filtrado en un tubo de centrífuga.
4. Centrifugar la suspensión celular a 1200rpm durante 5 minutos y desechar el sobrenadante.
5. Añadir la cantidad adecuada de medio de cultivo, centrifugar a 1200 rpm durante 5 minutos y desechar el sobrenadante.
6. Resuspender las células en medio de cultivo celular y tomar una pequeña cantidad de células para observar el estado de la digestión al microscopio.
7. Utilice celdas para experimentos posteriores según sea necesario.
8. (Opcional) El tampón de lisis de glóbulos rojos se puede utilizar para eliminar glóbulos rojos o células muertas durante el proceso de disociación del tejido.
Notas
1. Después de recibir la solución de disociación de tejidos, debe dividirse en paquetes de acuerdo con el uso real, almacenarse a -20 °C y tomarse según sea necesario para evitar la congelación repetida. y descongelación.
2. La solución de disociación de tejidos debe almacenarse a 2-8°C durante no más de 48 horas. El almacenamiento prolongado a 2-8°C reducirá el efecto de disociación del producto.
3. Si se utilizan células obtenidas de la disociación de tejidos para el cultivo celular, todas las operaciones deben realizarse en condiciones estériles.