¿Cuáles son los tipos de instrumentos de PCR y cómo elegir?

Las clasificaciones siempre son diversas. En términos generales, se puede dividir en dos categorías: instrumento de amplificación por PCR e instrumento de PCR de fluorescencia en tiempo real. Algunas personas también lo llaman semiautomático y completamente automático, o cualitativo y cuantitativo. Estos son nombres inexactos.

Lo más importante de la PCR es el proceso de calentamiento y enfriamiento. La PCR en baño de agua original constaba de tres baños de agua y un brazo robótico. Los tanques de reacción se retiraban periódicamente y se reemplazaban por baños de agua. Esta cosa es grande, rápida y lenta, pero los resultados en realidad no son peores que los de las máquinas de PCR posteriores, lo cual aprecio ahora. Más tarde, alguien utilizó métodos de refrigeración y calefacción para construir un amplificador de PCR con subidas y bajadas de temperatura fijas.

Más tarde, con el desarrollo de la tecnología cuantitativa, algunas empresas integraron el instrumento de amplificación con la detección hasta convertirse en el llamado instrumento de PCR automático (o cuantitativo). Por supuesto, el estándar se llama PCR cuantitativa de fluorescencia en tiempo real.

Marca

Todo tiene una marca. Existen muchas marcas de máquinas de PCR en el país y en el extranjero. En lo que respecta a los países extranjeros, los más famosos son:

ABI American Applied Biotechnology Company: la aristocrática y antigua empresa biológica compra PE original. La empresa PE es la creadora de la PCR y tiene muchos clásicos. Instrumentos de PCR, incluidos el 5700 (descontinuado), 7700 (descontinuado), 7000, 7900 y otros instrumentos de PCR cuantitativos de fluorescencia en tiempo real.

Diagnóstico de Roche: el novedoso LIGHTCYCLER es su único instrumento de PCR. El mercado va muy bien, centrándose en la investigación científica. Sin embargo, muchos hospitales del país lo están utilizando. Es el instrumento de PCR más exclusivo con centrifugación, calentamiento de gas y diseño capilar únicos. Por supuesto, la calidad es otra cuestión, por lo que sus capacidades técnicas únicas y su valentía son dignos de admiración.

MJ: Una celebridad que acaba de ingresar a China. Los amplificadores de MJ son muy famosos en el campo de la investigación de las ciencias biológicas. Los productos son más adecuados para la detección cuantitativa de Qualcomm y se utilizan ampliamente en el Proyecto Genoma Humano. De hecho, la PCR de fluorescencia en tiempo real acaba de llegar a China y su característica es la capacidad de aprovechar diferentes temperaturas entre pozos. En realidad, esto es más útil.

Bole: Ah, McDonald’s barato, ICYCLER es su producto estrella. Lleva mucho tiempo en China. El producto es el mismo que el 5700, que agrega un módulo cuantitativo al amplificador y se caracteriza por un precio más bajo.

También hay muchos proyectos en China, como Hangzhou Boli, Hangzhou Jilang, Shanghai Fengling, Xiamen Ampli, etc.

Seleccionar y comprar

Para ser precisos, no existe un sistema automático de adición y procesamiento de muestras, incluida la cuantificación de fluorescencia en tiempo real, y solo puede considerarse semiautomático. Un instrumento de PCR es algo simple, un dispositivo de control de temperatura y un dispositivo de detección.

En cuanto al control de la temperatura, es principalmente una cuestión mediática. El medio ideal es algo con buena conductividad térmica, calor específico alto y contacto cercano.

Los mejores en este sentido son los baños de agua y los baños de aceite. Tienen un calor específico alto (el aceite es mayor que el agua), los objetos están solvatados, el contacto con los reactivos es perfecto y el efecto es excelente. por supuesto el mejor. Sin embargo, la automatización y la miniaturización son difíciles y sólo se utiliza el tipo de baño de agua original.

El calentamiento con silicio es el método más utilizado. Tiene las ventajas de una fácil automatización, velocidad rápida, calentamiento y enfriamiento directo y buen efecto, pero el costo inicial es alto. En segundo lugar, el medio utilizado es metal, que tiene buena conductividad térmica, pero es difícil establecer un contacto perfecto con el tubo de reacción. Puede agregar aceite al realizar un análisis cualitativo, pero puede usar fluorescencia para ajustar la temperatura, ya que el aceite tiene una señal fluorescente, no se puede usar. Entonces es peor en contacto fluido. Nuevamente, debido a que se calienta desde abajo, la presión en la parte inferior es alta y puede desbordarse, pero el nuevo instrumento resuelve este problema calentando la tapa.

El calentamiento del aire utiliza aire como medio y tiene la ventaja de un contacto perfecto con el sistema de reacción. Sin embargo, el aire tiene debilidades obvias, como una mala conductividad térmica y un bajo calor específico. Por lo tanto, el calentamiento del aire debe utilizar centrifugación para generar flujo de aire para mejorar la conductividad térmica y, al mismo tiempo, utilizar tubos capilares para aumentar el área de contacto y utilizar trazas de reactivos para compensar. Después de hacer esto, el efecto sigue siendo bueno. Sin embargo, algunos fabricantes hablan mucho de las ventajas de la centrifugación y de los tubos capilares, pero guardan silencio sobre los puntos débiles del calentamiento por gas. Se trata de una técnica de marketing inteligente. Al mismo tiempo, el uso de la centrifugación tiene un impacto en el aumento del volumen de la muestra. Cuanto mayor es el volumen de la muestra, más obvia es la debilidad del calor específico del aire bajo. Por lo tanto, el volumen de la muestra de los instrumentos calentados por aire es relativamente pequeño.

Después de usar un tubo capilar, el área de contacto entre la solución de reacción y el tubo aumenta y el fenómeno de adsorción aumenta. Por tanto, el reactivo tiene poca versatilidad y alto coste. Aunque la dosis de reactivos es pequeña, al ser reactivos especiales, cada reactivo se calcula en función de la dosis real y no se guarda ningún reactivo. Pero el coste capilar aumenta.

En cuanto a funciones, todas las máquinas PCR son básicamente iguales. Lo único es que solo se puede usar el orificio MJ con diferentes temperaturas, lo cual es útil para probar varios artículos al mismo tiempo y ajustar los parámetros del ciclo. Sin embargo, los instrumentos de fluorescencia en tiempo real acaban de ingresar a China y aún se desconoce la situación específica.

En cuanto a la compra, depende de la situación de la empresa. Debido a que el contenido técnico de la PCR en realidad no es alto, los buenos instrumentos nacionales como Hangzhou Bioer (relacionado con el famoso fabricante japonés Yamato) no son tan malos. En cuanto a los instrumentos importados, los de Roche son buenos, pero si hay una gran cantidad de ejemplares, no se recomienda utilizar Roche. Uno se quemará. Además, el costo de compartir curvas estándar y controles para cada muestra es demasiado alto. Al mismo tiempo, los reactivos también son limitados.